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上期,我們介紹了酶定向進化的突變體文庫構建技術(點擊查看詳情)。高質量的突變體文庫是定向進化的基礎,與之相匹配的是高效、靈敏的突變體篩選技術手段。根據突變體酶參與反應的場所來區分,篩選技術可分為體內和體外篩選,篩選的通量和準確度正隨著技術的不斷升級而提升。體內篩選體內篩選是由菌株篩選衍生而來,目標酶活性與菌株生長、環境中底物代謝程度相關,性能缺陷的酶不足以支撐宿主形成單克隆,或無法使底物發生顯著變化。該方法適用于篩選與細菌生長、抗生素耐受等關鍵代謝途徑相關的酶,或可使底物發生顯著顏色變化的蛋白。
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想提高早篩靈敏度?這個不能錯過!DNA甲基DNA甲基化修飾在維持正常細胞功能、基因組結構穩定、遺傳印記、胚胎發育、及腫瘤和疾病的發生、發展起關鍵作用。5mC可以導致基因沉默或基因表達水平降低,而5hmC則會導致基因激活或基因表達水平增高,研究表明腫瘤抑癌基因的過甲基化或原癌基因的低甲基化在多種腫瘤中被發現。因此,分析基因組的甲基化水平具有重要的臨床意義。DNA甲基化與腫瘤早篩的最新研究進展甲基化與肺癌早篩《FrontiersinOncology》發表了DNA甲基化于肺癌早篩的重要進展。肺腺癌樣本
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干貨|翌圣核酸提取寶典,建議先收藏!核酸作為一切分子生物學研究的基礎,而且提取的核酸質量高低也是決定下游實驗成敗的關鍵因素之一。磁珠法提取和硅膠膜離心柱法提取是的兩種提取方法。那么,這兩種提取方法各有什么特點?提取流程與原理又是什么呢?核酸提取過程中的常見問題有哪些呢?硅膠膜離心柱法核酸提取原理硅膠膜表面的硅醇基團呈弱酸性,其水化后帶負電。當溶液中存在一定濃度的陽離子后,形成的陽離子橋能夠中和DNA和硅醇基團之間的表面負電荷,從而使DNA牢固地吸附在硅膠膜表面。反之,處于低鹽水溶液狀態下時,由于
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翌圣ZymeEditor™精品盤點之脫氧核糖核酸酶I(DNase I)
脫氧核糖核酸酶I(DeoxyribonucleaseI,DNaseI),是一種可以消化單鏈或雙鏈DNA的非特異性核酸內切酶。它能夠水解磷酸二酯鍵,產生含有5'-磷酸基團和3'-OH基團的單脫氧核苷酸和寡脫氧核苷酸。DNaseI最佳的工作pH范圍是7-8,其活性依賴于Ca2+,并可被二價金屬離子如Mn2+,Mg2+,Zn2+等激活。在Mg2+存在條件下,DNaseI隨機剪切雙鏈DNA的任意位點;Mn2+存在條件下,DNaseI可在同一位點剪切DNA雙鏈,形成平末端,或1-2個核苷酸突出的粘末端。圖 -
翌圣重組蛋白表達技術平臺,為您提供Hiacti™高活性重組蛋白產品
研發背景重組蛋白目前已被廣泛應用于干細胞和類器官培養、重組蛋白藥物、CAR-T細胞治療、抗體藥物等熱門研究領域。隨著生物藥行業的高速發展,重組蛋白市場發展迅猛,對品質的原料需求逐年遞增?;诳蛻魬脠鼍俺霭l,為了滿足科學研究及工業場景對重組蛋白不斷升級的應用需求,針對重組蛋白的蛋白活性低、批次間穩定性差等問題,翌圣生物基于自身多年研發生產經驗和技術的基礎上,建立了創新型重組蛋白表達與純化平臺,專注于提供高活性的重組蛋白。技術平臺1.多宿主(大腸、酵母、昆蟲、哺乳動物細胞)高效表達技術:高密度發酵 -
單細胞技術有多火?不用小翌多說。度娘隨便一搜,單細胞技術介紹眼花繚亂;Pubmed搜索Singlecell,高分文章數不勝數;更不論還有各種年度技術、年度先進技術等榮耀加持。從早期的Smart-seq、Drop-seq到后面的Singlecell(單細胞轉錄組、單細胞表觀組、單細胞多組學),甚至后面的單細胞代謝組、單細胞蛋白組,單細胞技術不段突破極限,為人類生物科學事業增加更多的新見解、新思路。在單細胞技術發展的道路上,科研人員一直呼吁國產替代,國產單細胞儀器也如破竹之勢占據了一定的市場,不僅進
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假病毒(pseudovirus)又稱“偽病毒”,是一類嵌合型病毒顆粒,是在一種復制缺陷型病毒(病毒載體)的表面上表達另一種病毒的重組糖蛋白的嵌合病毒顆粒[1,2]。它的基因通常被改變或修飾,具毒模擬的物理結構和特異性核酸序列的病毒樣粒子,其分析特性與真實病毒相似,但不具備自我復制和感染的能力,能夠參與到病毒檢測從提取到擴增的全過程。具有生物安全性的同的可作為測量標準,用于病毒核酸定性和定量測量方法的驗證評價以及實驗室的質量控制及疫苗和藥物的中和抗體檢測。圖1:病毒模式圖翌圣生物提供可溯源并具有高
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TaqDNA聚合酶的非特異擴增是PCR實驗中的常見問題,非特異擴增直接影響檢測結果的判讀并且會導致擴增靈敏度下降,甚至目標片段的得率下降等。利用酶修飾劑在常溫下封閉TaqDNA聚合酶酶活中心,抑制常溫下Taq酶的DNA聚合酶活性,是目前抑制非特異性擴增的方式。翌圣開發的雙封閉抗體,不僅可以封閉TaqDNA聚合酶的聚合酶活性,還能同時封閉TaqDNA聚合酶的外切酶活性,雙管齊下,既能有效防止錯配或引物二聚體引起的非特異性擴增,又能防止物料降解產生非特異信號,雙重提升試劑特異性,使檢測試劑在運輸或室