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復制型病毒(RCR/RCL)復制型病毒/病毒載體回復突變(ReplicationCompetentVirus,RCV),可產生于病毒載體制造過程中的所有步驟當中。并且,RCV感染宿主細胞后能隨宿主細胞在培養液中增殖、擴增對人體健康具有嚴重的隱患,是免疫細胞治療類產品,如CAR-T產品的主要安全性風險之一。近年來,CAR-T細胞制備過程中,伴隨載體的不斷升級優化,重組產生的復制型逆轉錄病毒/慢病毒(ReplicationCompetentRetrovirus/Lentivirus,RCR/RCL)
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新品上市 | 通用型高靈敏一步RT-qPCR試劑,省時高效!
一步法RT-qPCR是常用的RNA分析方法之一。在一步RT-qPCR中,反轉錄酶和DNA聚合酶預混于同一管內,從而使得在單個反應中就可同時進行反轉錄和DNA擴增。相比于進行完反轉錄,準備試劑配制熒光定量反應的兩步法而言,一步RT-qPCR更加簡單快速,移液步驟更少,污染的風險大大降低,對于高通量實驗應用十分適宜。Hifair®AdvancedOneStepRT-qPCRSYBRGreenKit是一款基于SYBRGreenI染料進行熒光定量的試劑盒。對于RNA樣本,試劑盒采用耐熱Hifair®VR -
你在進行RNA建庫時,是否遇到過這樣的困擾:RNA實驗時,有些試劑打開一股臭味襲來,尤其是樣本很多時,這酸爽簡直能把人帶走,讓人不得不懷疑這試劑是不是有毒性;建庫試劑要求避光,總不能全程黑燈熄火操作吧?這個毒性以及需要避光的罪魁禍首就是放線菌素D。那么,建庫試劑盒中為什么要加放線菌素D呢?相關資料顯示,放線菌素D(ActinomycinD)又稱更生霉素,分子中含有一個苯氧環結構,通過它連接兩個等位的環狀肽鏈。此肽鏈可與DNA分子的脫氧鳥嘌呤發揮特異性相互作用,使放線菌素D嵌入DNA雙螺旋的小溝中
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精品推薦 | 無需RNA提取,從細胞板直接獲得基因表達分析結果
精品推薦|無需RNA提取,從細胞板直接獲得基因表達分析結果如果你想要快速、簡便的進行細胞水平基因功能批量驗證;如果你的細胞珍貴不易獲取,想一次性針對多目標基因表達分析;如果你的起始細胞樣本稀少,希望樣本不被提取、避免損失;如果你的細胞目的基因表達水平低,希望多增加上樣量、提高成功率!Hieff®FastCellDirectProbeRT-qPCRKit針對細胞水平基因表達分析研究瓶頸設計,適用于對各種動物細胞直接進行RT-qPCR表達分析,用時短,操作簡單,出錯率低,最短只需1.5小時就可高效完 -
基因編輯在免疫細胞治療中的應用1.基因編輯是什么?基因編輯是通過人工核酸酶技術將靶基因或轉錄產物進行敲除,插入等精確修飾的基因工程技術。目前基因編輯已經在多個領域中有著重要的應用,在腫瘤治療中主要與免疫治療相結合,尤其在免疫細胞治療上有巨大的發展前景。2.基因編輯的分類?目前的基因編輯技術有可編程的核酸酶技術和BE(Baseeditors)及PE(Primeeditors)技術(圖1)。圖1.基因編輯技術分類[1]可編程核酸酶主要包括鋅指核酸酶(ZFNs)和轉錄激活因子樣效應核酸酶(TALENs
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漲知識|qPCR專場五:如何分析熒光定量數據?熒光定量PCR是實驗室中出鏡率非常高的一種檢測方法。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團來記錄DNA產物的累積情況,從而達到對PCR過程進行實時監控的目的,并且可以通過數據分析計算出起始模板量,這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實驗因為靈敏度高所以經常是差之毫厘謬以千里,所以在實驗過程中,我們需要注意諸多細節,謹慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了,我怎樣才能做好qPCR實驗,拿到實驗結果,發表高分文章,走上人生呢?熒光定量PCR可
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蛋白酶抑制劑/磷酸酶抑制劑為何清除蛋白中的蛋白酶及磷酸酶?在平衡狀態下內源性蛋白質產生并降解,因此其細胞水平是穩定的。當在體外從細胞和組織中提取蛋白質時,與蛋白一起釋放出來的還有許多能夠降解提取物中的蛋白質的內源酶,例如磷酸酶和蛋白酶。此時由于蛋白質產生被顯著抑制,降解繼續,因此這些酶可以快速降解提取物中的蛋白。為了防止蛋白純化過程中目的蛋白不受蛋白酶的破壞,需要加入蛋白酶抑制劑對其進行活性抑制。另外,細胞中蛋白的磷酸化和去磷酸化是信號轉導、細胞增殖、細胞分化和細胞凋亡等許多重要的生物學活動的調
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蛋白免疫印跡技術大揭秘!近距離防踩坑~蛋白免疫印跡技術是分子生物學中常用的三種印記技術之一,具有分析容量大、敏感度高、特異性強等優點,是檢測蛋白質特性、表達與分布的一種的方法,如組織抗原的定性定量檢測、多肽分子的質量測定及病毒的抗體或抗原檢測等。被廣泛應用于蛋白質相互作用、疾病診斷和藥物研發等領域。為助力解決蛋白免疫印跡技術中出現的問題,提高科研工作者的基礎技能水平,山東大學齊魯醫院(第一臨床學院)學生黨總支研究生第九黨支部聯合翌圣生物,于9月12日(本周二)舉辦“新學期,新征程——蛋白免疫印跡