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表觀遺傳學是指研究活性和非活性基因表現的遺傳變化。變化的來源既可以是外在環境因素,也可以是內在因素,例如年齡和疾病。它通常用于診斷潛在疾病并防止其遺傳給后代。IMARC Group的市場調研報告顯示2022年全球表觀遺傳學市場規模達21億美元,預計到2028年市場規模將達到51億美元,2022-2028年復合年增長率(CAGR)為15.9%。
眾多表觀遺傳研究技術中,ATAC-seq(Assay for Transposase Accessible Chromatin with high-throughput sequencing)可謂,自2015年問世以來,,且逐漸成為表觀研究課題必選技術之一。
ATAC-seq介紹
ATAC-seq全稱Assay for Transposase Accessible Chromatin with high-throughput sequencing,即利用轉座酶研究染色質可進入性的高通量測序技術。多數基因組中的染色質都緊緊盤繞在細胞核內,但也有一些區域經染色質重塑后呈現出松散的狀態,這部分無核小體的裸露DNA區域被稱為開放染色質(open chromatin),而DNA復制和基因轉錄都發生在這些區域。 染色質的這種特性叫做染色質的易接近性(chromatin accessibility),通過研究細胞特定狀態下開放的染色質區域可以在DNA水平上了解其轉錄調控。
開放染色質區域:染色質是否呈疏松結構是決定轉錄功能的關鍵因素,該區域通常是一些順式調控元件結合區域;
此時Tn5酶利用空間位阻效應進行識別和切割,Tn5酶會優先整合到主動轉錄或高度超卷曲的DNA區域中(即染色質開放區域)。
ATAC-seq技術應用
通過ATAC-seq可以獲得豐富的表觀遺傳信息,包括開放染色質圖譜、核小體定位、轉錄因子結合位點,并通過鑒定染色質開放區域中轉錄因子結合位點,分析得到轉錄因子及調控區域。
染色體開放性圖譜繪制;
胚胎發育表觀遺傳修飾;
疾病潛在標志物的預測;
腫瘤發生表觀機制研究;
腫瘤分型與微環境研究。
圖.ATAC研究的開放區域中,DNA結合蛋白結合DNA后,影響下游基因的轉錄
ATAC建庫試劑盒優勢
含lysis buffer(細胞核打孔);
含ATAC建庫全套試劑,轉座反應后的小片段專用純化磁;
含Digitonin和tween-20,增加細胞核通透性。
ATAC建庫試劑盒性能
圖.100-10 w細胞投入量進行ATAC建庫,結果一致性較高。
圖:凍存細胞進行ATAC建庫,結果一致性較高。
注:樣本需要進行長期保存時,建議用液氮保存,-80℃冰箱保存時間不超過4周。
圖:競品試劑盒與翌圣ATAC試劑盒進行性能對比,從100-10w細胞,文庫結果一致性較高,且文庫測序結果一致(另外,100個細胞投入,翌圣結果優于競品)
ATAC技術文章應用
ATAC開放性圖譜繪制
Howard Y. Chang教授團隊從癌癥基因組圖譜組織(TCGA)中選取23種癌癥類型,410個腫瘤樣品進行ATAC-seq分析,繪制了囊括23種人類癌癥類型的796個全基因組染色質可接近性圖譜,平均每種癌癥類型中鑒定了近十萬個染色質可接近性敏感位點,揭示了一系列與染色質可接近性有關的調控相互作用,這些相互作用可改變與癌癥風險和治療結果相關的基因表達。
The chromatin accessibility landscape of primary human cancers
原發性人類癌癥的染色質可及性景觀
期刊:Science IF:41.037
圖.410 個樣本繪制23種癌癥的染色質可及性圖譜
ATAC在胚胎發育中的遺傳修飾
文章聯合ATAC-seq和RNA-seq檢測了早期胚胎發育過程中各時期染色質結構開放區域的動態變化,發現不同時期的細胞開放區域的動態變化情況,并得到胚胎發育時期關鍵轉錄因子,繪制出了小鼠早期胚胎中全基因組易接近性染色質圖譜。
The landscape of accessible chromatin in mammalian preimplantation embryos
哺乳動物植入前胚胎中可及染色質的景觀
期刊:Nature IF:40.137
圖.小鼠著床前胚胎細胞染色質開放性可視圖
翌圣生物ATAC建庫試劑盒為即用型ATAC建庫試劑盒,將樣本提核后,按照說明書操作,無需其他試劑,即可構建ATAC文庫。
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