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Ceturegel Basement Membrane Matirx簡介

2022-2-25  閱讀(428)

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Ceturegel Basement Membrane  Matirx 基質膠

 

類器官(organoids)是指一種利用干細胞、祖細胞等在體外培養出的3D細胞培養物并具有一定的空間結構組織類似物。2021年,類器官技術被列為“十四五”國家重點研發專項[1],作為疾病模型,相比于傳統2D疾病模型,類器官在闡明疾病的發展、穩態性和發病機理等與體內環境更加接近,在多領域將發揮重要,諸如細胞治療、藥物研發、基因工程、免疫研究、組織再生等領域。基質膠作為類器官和3D培養的重要載體,在其中發揮著舉足輕重的作用。

 


1.Q.jpg

圖:類器官培養發展歷史過程[2]

基質膠是從富含胞外基質蛋白EHS小鼠腫瘤中提取取的可溶性基底膜制備物,其主要成分由層粘連蛋白,Ⅳ型膠原,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)和巢蛋白等組成,還包如TGF-β、EGF、IGF、FGF等多種生長因子。在室溫條件下,基質膠聚合形成具有生物學活性的三維基質,能模擬體內細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能,有利于體外細胞的培養和分化。

13.jpg

                               

翌圣生物開發生產的CeturegelTM Matrix基質膠不含LDEV(乳酸脫氫酶增高病毒),超低內毒素含量,包括基本濃度、高濃度、低生長因子和干細胞和類器官專用不同類型的基質膠。

 

 

應用方向

 

 

 

產品特點

 

 

安全性高:不含LDEV(乳酸脫氫酶增高病毒)

濃度多樣性:濃度范圍在8~20 mg/ml之間

批次穩定性好:嚴格生產質檢過程保證批次間性能穩定

低內毒素:內毒素含量<4 EU/ml

污染物檢測: 經檢測無支原體和細菌、真菌殘留

單批產量高:單批產量在L級別以上

兼容性好:可與任何類型的細胞培養基兼容

 

 

應用流程

 

 

凝膠制備方法

1)基質膠融化后,用預冷的槍頭混勻基質膠。

2)將需要使用的培養板置于冰上,然后將培養的細胞與基質膠混合,用遇冷的槍頭使細胞懸浮均勻。按照150-200 μL/cm2生長面積的濃度加入基質膠制備3D培養使用的凝膠,詳見表1。

3)在37℃放置30min,此時即可加入細胞培養液。

4Q.jpg

圖:3D細胞及類器官培養過程


表1:3D細胞培養基質膠使用參考:

培養板(皿)類型

細胞培養面積(cm2)

推薦量(濃度≥3 mg/mL)*

6孔板

9.6

200 μL/cm2

12孔板

4.5

180 μL/cm2

24孔板

2.0

180 μL/cm2

96孔板

0.32

160 μL/cm2

35mm培養皿

11.78

200 μL/cm2

100mm培養皿

58.95

200 μL/cm2

注:不同批次基質膠有一定的濃度差異,推薦量僅供參考

 

FAQ

 

 

1、拿到的基質有色差的變化(淡黃色到深紅色)是什么原因?

對于含酚紅的基質膠主要原因是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,但是與5%CO2平衡后色差即會減少。凍融后,輕輕搖晃試劑瓶使基質膠分散均勻。

2、基質膠的操作要注意哪些事項?

所有操作需在無菌環境下進行,應使用預冷的器材以保證基質膠正常操作。

3、基質膠的如何分裝凍存使用?

可將凍融后的CeturegelTM Matrix基質膠分裝在多個凍存管,凍存管需預冷,分裝后迅速冷凍并保存,避免多次凍融。

 

 

相關產品

 

 

產品類型

產品名稱

產品編號

規格

基本濃度

CeturegelTM Matrix LDEV-Free基質膠

40183ES08/10

5/10 mL

CeturegelTM Matrix Phenol Red-FreeLDEV-Free 基質膠

40184ES08/10

5/10 mL

低生長因子

CeturegelTM Matrix GFRLDEV-Free 基質膠

40185ES08/10

5/10 mL

CeturegelTM Matrix GFR Phenol Red-FreeLDEV-Free 基質膠

40186ES08/10

5/10 mL

高濃度

CeturegelTM Matrix High ConcentrationLDEV-Free 基質膠

40187ES08/10

5/10 mL

CeturegelTM Matrix High ConcentrationPhenol Red-FreeLDEV-Free 基質膠

40188ES08/10

5/10 mL

CeturegelTM Matrix High ConcentrationGFRLDEV-Free 基質膠

40189ES08/10

5/10 mL

 


[1]  chinazx.org./i.php?id=3398

[2]  Corrò C, Novellasdemunt L, Li VSW. A brief history of organoids. Am J Physiol Cell Physiol. 2020 Jul 1;319(1):C151-C165. doi: 10.1152/ajpcell.00120.2020. Epub 2020 May 27

 

 

 

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