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如何10min完成細胞活力檢測
如何快速精確的檢測細胞活力，科研人員一直在探尋新的檢測手段。ATP 是細胞內(nèi)最重要的能量分子，可以用來衡量細胞新陳代謝水平并與活細胞數(shù)目具有良好的線性關系，可通過ATP 含量反應活細胞的數(shù)目。本試劑盒是借助ATP 依賴的熒光素酶催化的熒光素發(fā)光反應，通過化學發(fā)光信號測定細胞內(nèi)ATP 含量，從而檢測細胞活力或定量檢測活細胞數(shù)目并且具有靈敏度高、線性范圍寬，適合高通量篩選檢測。
圖：ATP Luminescent檢測原理圖
表：不同細胞活力檢測方法的優(yōu)劣對比
方法 | 甲?水溶性 | 靈敏度 | 檢測時間 | 檢測指標 | 細胞毒性 | 試劑穩(wěn)定性 | 高通量檢測 | 使用便捷度 |
MTT法 | 差 | ＋＋ | 較長 | A560-600nm | 高，細胞形態(tài)消失 | ＋ | ＋＋ | ＋ |
WST-1法 | 好 | ＋＋＋ | 較短 | A420-480nm | 低，細胞形態(tài)不變 | ＋＋＋＋ | ＋＋＋＋ | ＋＋＋ |
CCK-8法 | 好 | ＋＋＋ | 較短 | A420-480nm | 低，細胞形態(tài)不變 | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋＋ | ＋＋＋＋ |
Calcein AM法 | 不涉及 | ＋＋＋＋ | 很短 | 熒光 | 低，細胞形態(tài)不變 | ＋＋＋＋ | ＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ |
EdU法 | 不涉及 | ＋＋＋＋＋ | 較短 | 熒光 | 細胞被固定 | ＋＋＋＋ | ＋＋＋ | ＋＋ |
ATP酶法 | 不涉及 | ＋＋＋＋＋ | 極短 | 化學發(fā)光 | 細胞被裂解 | ＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ |
1、操作簡單，檢測速度快
將試劑與待測樣品按照同體積混合反應10min即可上機檢測，無需洗滌換液等步驟。
圖：ATP Luminescent試劑盒檢測流程圖
2、檢測靈敏度高，線性范圍寬
能在10~10萬個細胞范圍內(nèi)測定并呈現(xiàn)良好的線性關系。下圖是Yeasen產(chǎn)品與國外P*公司同類產(chǎn)品對比測試。
a.線性測試
圖：對由低到高不同細胞數(shù)及不同細胞類型，均展現(xiàn)出極優(yōu)的線性度
b.信號強度測試
圖：對于不同的檢測時間，熒光信號均強于進口品牌P公司。信號穩(wěn)定性也更好。
3、穩(wěn)定性好
反復凍融5次對檢測效果基本無影響、4℃保存3天對檢測效果無顯著影響、室溫保存1天，仍可保留80%以上的檢測效果、本產(chǎn)品即使僅保留約50%的檢測效果，仍可以滿足各種常規(guī)檢測
Q：ATP的細胞活力檢測試劑，可以在熒光顯微鏡下觀察拍照嗎？
A：不可以，該試劑盒的檢測原理是化學發(fā)光法。
Q: 試劑盒可以檢測ATP的量嗎?是否有標準品？
A: 是檢測活細胞類atp的量，與cck8類似，用酶標儀測發(fā)光值，沒有標準品。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 |
ATP Luminescent Cell Viability Assay Kit ATP Luminescent 細胞活力檢測試劑盒 | 40210ES10 | 10 mL |
40210ES60 | 100 mL | |
40210ES80 | 10×100 mL |
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 |
Cell Counting Kit（CCK8）CCK-8試劑盒 | 40203ES76 | 500 T |
40203ES80 | 1000 T | |
40203ES88 | 3×1000 T | |
40203ES92 | 10×1000 T |
