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燙傷基礎定義:由無火焰高溫液體(沸水、熱油)、固體(熱金屬)或蒸汽導致的組織損傷,破壞皮膚屏障功能,增加病原體定植風險。
自發感染模型:燙傷后不主動接種病原菌,依賴環境微生物自然定植,模擬臨床繼發感染。
外源性感染模型:燙傷后立即接種特定病原菌(如金黃色pu萄球菌、銅綠假單胞菌),可控性強,用于機制研究。
分級 | 病理特征 | 臨床意義 |
---|---|---|
Ⅰ度 | 表皮紅腫、疼痛,無水皰 | 輕微損傷,自愈快 |
淺Ⅱ度 | 表皮全層壞死,水皰形成,真皮淺層炎癥 | 易感染,愈合時間中等 |
深Ⅱ度 | 真皮深層壞死,痛覺遲鈍,基底蒼白 | 高感染風險,易留瘢痕 |
Ⅲ度 | 全層皮膚壞死,呈蠟白/碳化,干燥無彈性 | 需植皮,感染并發癥率高 |
Ⅳ度 | 深達肌肉/骨骼 | 罕見,多合并全身性感染 |
注:分級標準參考三度四分法。 |
動物 | 優勢 | 局限性 | 適用場景 |
---|---|---|---|
小鼠 | 成本低、易操作、遺傳背景清晰 | 皮膚薄,與人類差異較大 | 大規模藥物篩選、機制初探 |
大鼠 | 體型適中,適合復雜操作(如休克復蘇) | 皮膚結構與人類仍存差異 | 感染動力學、全身炎癥反應研究 |
豬 | 皮膚結構(厚度、毛囊、代謝)與人類高度相似 | 成本高、飼養復雜 | 臨床前治療策略驗證 |
兔/豚鼠 | 皮膚較厚,適用于深度燙傷模型 | 免疫反應差異需謹慎解讀 | 創面修復與瘢痕形成研究 |
方法選擇:
熱水燙傷法:動物脫毛麻醉后,背部浸入恒溫水浴(溫度/時間因動物而異):
大鼠:92℃水浸18秒 → Ⅲ度燙傷;100℃砝碼壓5秒 → 淺Ⅱ度。
小鼠:80℃水浸20秒 → Ⅲ度;55℃水浸20秒 → Ⅱ度。
熱金屬接觸法:銅塊/電烙鐵預加熱至80–100℃,垂直按壓皮膚(時間控制深度)。
深度驗證:48小時后組織學檢查(HE染色),確認真皮壞死程度。
菌種選擇:臨床常見病原體如金黃色pu萄球菌(ATCC 25923)、銅綠假單胞菌。
接種方法:
刮擦法:創面輕微刮擦后滴注菌液(20μl,濃度1×10?–1×10? CFU/mL)。
直接涂布:均勻涂布菌液于創面(大鼠:1ml菌液)。
優化濃度:小鼠模型驗證顯示1×10? CFU/mL為最佳感染濃度(顯著延遲愈合,P<0.01)。
單籠飼養避免交叉感染,自由飲水飲食。
定期檢測痂下細菌載量(>1×10? CFU/g組織提示感染成立)。
細菌載量:
痂下組織定量培養(CFU/g)。
內臟(肝、腎、肺)細菌定植評估全身播散。
炎癥反應:
局部:HE染色觀察中性粒細胞/單核細胞浸潤;ELISA檢測創面促炎因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)↑ 和抗炎因子(IL-10)↓。
全身:血清HMGB-1(損傷相關分子)、透明質酸↑,纖維連接蛋白↓。
愈合時間:感染組愈合時間顯著延長(小鼠:15.92±0.34天 → 21±0.95天)。
組織病理學:
光鏡觀察上皮再生、膠原排列、肉芽形成。
IHC染色檢測凋亡標志物(如cC3上調)。
死亡率:感染組5天存活率降至40%(對照組100%)。
血常規:白細胞總數↑(尤其粒細胞/單核細胞)。
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