串聯泛素結合實體(TUBEs)的使用正在成為泛素研究中需要的策略(1, 2)。第一代TUBEs能夠與K48和K63連接的四聚泛素鏈結合,其解離常數(Kds)在個位數納摩爾范圍內,比單體UBAs的結合強度高出約100到1000倍。TUBEs還可以在沒有通常用于阻斷此類活性的抑制劑的情況下,保護蛋白質免受去泛素化酶(DUBs)和蛋白酶體的降解。這使得在比上述條件更不易改變細胞生理學的情況下,能夠高效地從細胞系、組織和器官中分離天然多泛素鏈及其附著的蛋白質。TUBE 1和TUBE 2最近已被證明能夠富集所有多泛素鏈連接類型,且不加區分,即使目標蛋白的連接類型未知,這些試劑也適用。
K63 TUBE的開發是為了對K63連接的多泛素鏈(約20納摩爾)顯示出比所有其他連接類型(>2微摩爾)更高的選擇性。它可以單獨使用,也可以與我們的其他TUBE產品(特別是K48 TUBE HF和M1(線性)TUBE)結合使用,以研究底物蛋白中的多泛素鏈連接類型。磁性TUBEs是直接與磁性珠子偶聯的TUBE部分,用于通過Western blotting和/或下游蛋白質組學研究來鑒定和表征多泛素化蛋白。磁性TUBEs便于實現多泛素化蛋白的便捷“一步"捕獲。
艾美捷K63 TUBE(磁珠):
貨號:UM-0404M-1000
分子量:不適用
物理狀態:液體
數量:1 mL
濃度:可變
儲存:+4℃,避免在此溫度以下儲存
K63 TUBE(磁珠)應用:
從細胞和組織提取物中分離和富集K63多泛素化蛋白
分離K63多泛素化蛋白用于蛋白質組學研究
K63 TUBE(磁珠)優勢:
對K63多泛素鏈的偏好性比其他所有連接類型高出100倍
TUBEs對多泛素的親和力高于大多數泛素抗體
避免過度表達用于捕獲的表位標簽泛素
K63 TUBE(磁珠)文獻參考:
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Messick, T. E., and Greenberg, R. A. (2009) The ubiquitin landscape at DNA double-strand breaks, J Cell Biol 187, 319-326.
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deubiquitylation in the endocytosis and lysosomal targeting of plasma membrane KCa3.1, FASEB J 25,3938-3948.
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Hjerpe, R., and Rodriguez, M. S. (2008) Efficient approaches for characterizing ubiquitinated proteins,Biochem Soc Trans 36, 823-827.
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