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流式細胞儀該如何選擇呢?

閱讀:18          發布時間:2025-6-12
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流式細胞儀該如何選擇呢?

一、明確核心應用場景

1. 檢測目的

  • 細胞分析(Analytical):適用于細胞表型鑒定、凋亡檢測、細胞周期分析等,選擇分析型流式細胞儀即可(如 BD FACSCalibur、貝克曼 CytoFLEX S)。

  • 細胞分選(Sorting):需將特定細胞群體分離出來(如單克隆篩選、稀有細胞富集),必須選擇分選型流式細胞儀(如 BD FACSAria、Cytek AURORA sorter),但價格更高(通常為分析型的 2-5 倍),且需符合生物安全等級(如分選感染性樣本需配備生物安全柜)。

2. 樣本類型

  • 常規細胞樣本:血液、細胞培養液、組織消化液等,普通流式細胞儀即可處理;

  • 特殊樣本

    • 微量樣本(如穿刺液、外泌體):需選擇支持低流速進樣或微量上樣模塊的儀器(如 Cytek Northern Lights);

    • 高通量樣本(如臨床批量檢測):需配備自動進樣器(如 BD FACSymphony 的 96 孔板進樣模塊);

    • 固定化樣本 / 熒光微球:需確認儀器激光功率和檢測器靈敏度是否匹配。

二、關鍵技術參數篩選

1. 激光器配置與熒光參數數量

  • 激光器數量:決定可檢測的熒光染料種類,常見配置:

    • 入門級:1-2 激光(488nm 藍光 + 633nm 紅光,適用于 3-5 色檢測,如 BD Accuri C6);

    • 科研級:3-5 激光(新增 405nm 紫光、488nm 藍光、561nm 綠光等,支持 6-15 色檢測,如貝克曼 CytoFLEX LX);


  • 熒光通道(Detector):需根據實驗中使用的熒光染料(如 FITC、PE、APC、Alexa Fluor 系列等)匹配其激發 / 發射波長,例如:

    • 488nm 激光可激發 FITC(發射 525nm)、PE(575nm)、PerCP(670nm)等;

    • 633nm 激光可激發 APC(660nm)、APC-Cy7(780nm)等。

2. 檢測靈敏度與分辨率

  • 靈敏度:以熒光微球的最小檢測濃度衡量(如可檢測<50MESF 的熒光強度),靈敏度越高,越適合弱熒光信號(如細胞內細胞因子、稀有抗原)檢測;

  • 分辨率:主要看前向散射光(FSC,反映細胞大?。┖蛡认蛏⑸涔猓⊿SC,反映細胞顆粒度)的區分能力,優質儀器可清晰分辨血小板、紅細胞、白細胞等微小差異。

3. 檢測速度與分選效率

  • 分析速度:通常以每秒檢測細胞數(Events/s)為指標,常規儀器可達 10,000-50,000 Events/s,高速型(如 BD FACSymphony)可達 100,000+ Events/s;

  • 分選速度:分選型儀器需關注每秒分選細胞數(如 1,000-10,000 Cells/s)及純度(>99%),同時需考慮液滴偏轉技術(如充電脈沖式、聲學聚焦式)對細胞活性的影響。

三、硬件與功能擴展性

1. 進樣系統與樣本容量

  • 手動進樣 vs 自動進樣:手動進樣適合少量樣本(<20 管 / 天),自動進樣器(如 96 孔板、384 孔板模塊)適合高通量場景,但需額外付費(約占儀器總價 10%-20%);

  • 樣本量兼容性:如支持微量上樣(10-50μL)或大體積上樣(5-10mL),避免樣本浪費。

2. 升級空間

  • 激光器升級:部分儀器支持后期添加激光器(如初始配置 3 激光,可升級至 5 激光),但需確認廠商是否提供改裝服務;

  • 軟件模塊擴展:如是否支持質譜流式(CyTOF)、光譜流式(Spectral Flow Cytometry)等高級功能(需硬件 + 軟件同時支持)。

四、品牌與售后服務評估

1. 主流品牌特點

品牌優勢領域代表型號適合場景
BD臨床檢測、高速分選FACSAria、FACSymphony醫院、大型科研機構
貝克曼(Beckman)多色分析、性價比高CytoFLEX 系列高校、科研院所
Cytek光譜流式(全光譜檢測)AURORA、Northern Lights復雜多參數分析、免疫學
索尼(Sony)微流控分選、細胞活性保護SH800、iCELLigence干細胞研究、稀有細胞分選
國產(如邁瑞、博奧晶典)性價比高、本土服務響應快MFI 系列、Aries教學實驗室、基礎科研

2. 售后與技術支持

  • 裝機培訓:是否提供現場操作培訓(至少 3 天)及進階課程(如多色實驗設計);

  • 響應時間:廠商工程師上門維修的承諾時效(如 48 小時內),是否有本地服務中心;

  • 軟件更新:是否免費提供軟件升級(如新增數據分析模塊),避免版本落后影響功能。

六、合規與特殊需求適配

1. 臨床 / 法規要求

  • 若用于臨床檢測(如白血病免疫分型),需選擇具備 NMPA(中國)或 FDA(美國)認證的機型(如 BD FACSCanto II、貝克曼 CytoFLEX S Clinical);

  • 生物安全等級:分選感染性樣本(如 HIV、新冠病毒相關細胞)需選擇具備封閉分選系統(如 BD FACSAria III BSL3 模塊)的儀器。

2. 數據管理與合規性

  • 軟件是否支持電子數據記錄(符合 GLP/GMP 要求)、數據加密及審計追蹤功能;

  • 是否兼容實驗室信息管理系統(LIMS),便于高通量數據整合。

七、選型流程建議

  1. 列出實驗需求清單:如檢測色數、樣本類型、分選需求、預算范圍;

  2. 聯系廠商預約 Demo:攜帶實際樣本測試儀器性能(如熒光分辨率、分選純度);

  3. 對比用戶評價:參考同行使用反饋(如 “儀器穩定性"“軟件易用性");

  4. 談判附加服務:爭取免費延保、耗材折扣、培訓名額等優惠

    流式細胞儀的應用為什么那么廣泛?




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