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新品 | 翌圣GMP級別RNA合成酶原料:BsaI

2023-8-25  閱讀(396)

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mRNA合成的關鍵步驟之一是將質粒DNA進行線性化,這一步需要使用限制性內切酶,IIs型內切酶是質粒線性化的內切酶,因為它們在識別位點下游切割DNA,可確保所設計的poly(A)尾的完整性,線性化后的DNA模板上不會留下“疤痕",IVT過程中也不會添加不需要的核苷酸。BsaI是常見的IIs型內切酶之一,在mRNA合作中起著重要作用。


 

圖1. BsaI識別位點及切割序列

 

 

翌圣GMP級別BsaI

翌圣的BsaI由大腸桿菌重組表達,GMP標準生產,酶切效率高、星號活性低、末端完整性良好,可用于mRNA疫苗生產的質粒線性化、慢病毒/腺病毒包裝的載體構建、質粒制備的酶切驗證、Golden Gate組裝等。

 

 

產品特點

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
1、完成FDA DMF備案(備案號:MF038306)
 
2、GMP級別,無動物源成分,嚴格質控
  • 嚴格按照GMP標準生產,確保無動物源成分引入。核酸酶,蛋白酶、宿主DNA/蛋白殘留、支原體、內毒素等均嚴格質控確保產品質量。

3、高酶切效率,低星號活性,末端完整性良好
  • 具有高酶切效率,37℃反應16 h無星號活性,經酶切—連接—再酶切測試末端完整性良好。

 

4、性能*,應用端性能媲美競品

 

 

部分數據展示
01
無非特異性核酸酶殘留
 
 

將20 U BsaI與底物DNA在37℃孵育 1 h和16 h,瓊脂糖凝膠電泳比較DNA譜帶變化。結果顯示翌圣BsaI無非特異性核酸酶殘留。

 

圖2非特異性核酸酶殘留檢測結果

 

02
末端完整性良好,與進口品牌效果一致
 
 

通過“酶切—連接—再酶切"的功能實驗驗證BsaI酶切的末端完整性,結果顯示翌圣的BsaI末端完整性良好,與進口品牌效果一致。

圖3. BsaI末端完整性檢測結果

 

03
末端完整性良好,與進口品牌效果一致
 
 

在37℃下,將BsaI及底物DNA在酶切反應體系中共同孵育16h,未檢測到星號活性引起的底物非特異性降解,表明翌圣BsaI 16 h孵育無星號活性。

圖4. BsaI星號活性檢測結果

 

 

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