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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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mRNA合成的關鍵步驟之一是將質粒DNA進行線性化，這一步需要使用限制性內切酶，IIs型內切酶是質粒線性化的內切酶，因為它們在識別位點下游切割DNA，可確保所設計的poly(A)尾的完整性，線性化后的DNA模板上不會留下“疤痕"，IVT過程中也不會添加不需要的核苷酸。BsaI是常見的IIs型內切酶之一，在mRNA合作中起著重要作用。
圖1. BsaI識別位點及切割序列
翌圣的BsaI由大腸桿菌重組表達，GMP標準生產，酶切效率高、星號活性低、末端完整性良好，可用于mRNA疫苗生產的質粒線性化、慢病毒/腺病毒包裝的載體構建、質粒制備的酶切驗證、Golden Gate組裝等。
產品特點
嚴格按照GMP標準生產，確保無動物源成分引入。核酸酶，蛋白酶、宿主DNA/蛋白殘留、支原體、內毒素等均嚴格質控確保產品質量。
具有高酶切效率，37℃反應16 h無星號活性，經酶切—連接—再酶切測試末端完整性良好。
將20 U BsaI與底物DNA在37℃孵育 1 h和16 h，瓊脂糖凝膠電泳比較DNA譜帶變化。結果顯示翌圣BsaI無非特異性核酸酶殘留。
圖2. 非特異性核酸酶殘留檢測結果
通過“酶切—連接—再酶切"的功能實驗驗證BsaI酶切的末端完整性，結果顯示翌圣的BsaI末端完整性良好，與進口品牌效果一致。
圖3. BsaI末端完整性檢測結果
在37℃下，將BsaI及底物DNA在酶切反應體系中共同孵育16h，未檢測到星號活性引起的底物非特異性降解，表明翌圣BsaI 16 h孵育無星號活性。
圖4. BsaI星號活性檢測結果
