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潰瘍性結腸炎(ulcerative colitis,UC)是一種慢性非特異性結腸炎性反應,病變主要位于結腸的黏膜層,臨床表現為持續或反復發作的腹瀉、黏液膿血樣便伴腹痛,該病病程長,治愈難度大,且與結腸癌關系密切,屬于消化系統難治疾病之一。
隨著近些年細胞治療的發展,研究人員也開始在細胞領域探索新的治療方法。隨著類器官研究的大熱,腸道干細胞成為腸道損傷再生、腸癌等多種腸道疾病研究的焦點。
腸道類器官的培養
隨著近些年細胞治療的發展,類器官這個詞,也從陌生逐漸被熟知。
腸道類器官的培養——將分離的腸道隱窩或干細胞植入含有多種生長因子的基質膠中,在基質3D支撐下生成具有腸道上皮樣結構的微型空心球體,這些球體被稱為腸道類器官。這些類器官包含有所有種類的腸道功能上皮細胞,可以較大程度模擬腸道組織,可被廣泛應用于炎癥性腸病、腸道損傷再生、腸癌等多種腸道疾病的研究。
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圖1 小鼠小腸類器官體外培養結果圖
類器官在治療潰瘍性結腸炎疾病中的應用
日本東京醫科齒科大學(TMDU)研究團隊提出了一個詳細方案,用移植的3D干細胞類器官結構來再生在結腸中受損的腸道組織。
利用干細胞的再生能力,使用腸道類器官來替代受損的腸道組織。通常情況下,潰瘍性結腸炎的大部分上皮細胞受損,為了開發將腸類到結腸的系統,研究人員使用硫酸葡聚糖鈉(DSS)損傷模型,通過一根柔性導管將類器官注入患有結腸炎的小鼠結腸中,并用膠水封閉邊緣,使培養的上皮細胞能夠附著在受損表明并填充干細胞壁龕。實驗結果表明,腸道內壁其中受體的部分幾乎完整的上皮襯里已被供體細胞所取代。
Yeasen DSS造模數據
目前有多種動物模型被廣泛用于研究炎癥性腸炎(inflammatory bowel disease,IBD)的病因、發病機制及測試新開發藥物藥效等,尤其以葡聚糖硫酸鈉鹽結腸炎(ulcerative colitis,UC)模型應用廣。
YEASEN提供高品質葡聚糖硫酸鈉鹽(Dextran Sulfate Sodium Salt,DSS MW:36000~50000),Cat#60316ES,高純度(98%),含硫量(16-20%),游離硫(<0.2%)。
1. 小鼠體重下降
圖2 Yeasen DSS(貨號:60316ES,批號:D1124051)造模數據(C57/B6J,雌鼠,8 周齡)
2. 小鼠結腸炎H&E染色結果
圖3 H&E染色結果(Gao X, et al. The Journal of Nutritional Biochemistry, 2020, 83.)
l 實驗動物: BALB/c,雌性,6-8 周齡,25 g
l 實驗方法: 3.5% DSS自由飲水7天
3. 小鼠結腸癌H&E染色結果
圖4 H&E染色結果(Jia-Rong Huang, et al.Frontiers in Pharmacology.2020.586885)
l 實驗動物: BALB/c,雄性,7周齡
l DSS濃度: 2.5%
l AOM濃度:10 mg/kg
l 實驗周期:10周