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口腔癌是發(fā)生于口腔黏膜的惡性腫瘤, 絕大多數(shù)為鱗狀細(xì)胞癌, 包括發(fā)生于舌、頰、口底、唇、牙齦等黏膜的癌瘤。口腔癌發(fā)病率高, 且侵潤(rùn)和轉(zhuǎn)移出現(xiàn)較早, 目前臨床尚無(wú)好的治療方法, 因此口腔癌動(dòng)物模型的研究一直受到重視。
4-硝基喹啉-N-氧化物（4-Nitroquinoline N-oxide，4-NQO）是一種水溶性喹啉衍生物，能夠通過(guò)氧化應(yīng)激損傷和抑制DNA合成等機(jī)制誘導(dǎo)鱗狀細(xì)胞癌的產(chǎn)生。4-NQO誘導(dǎo)腫瘤的產(chǎn)生具有組織特異性，口服主要誘導(dǎo)口腔及上消化道系統(tǒng)腫瘤的形成，皮下注射主要誘導(dǎo)肺癌的形成。
圖1 4-NQO分子結(jié)構(gòu)
4-NQO誘導(dǎo)口腔癌建模步驟
動(dòng)物：
4-NQO可以誘導(dǎo)大多數(shù)動(dòng)物發(fā)生口腔癌，但是此類模型主要應(yīng)用于嚙齒類動(dòng)物（如大鼠和小鼠）。
4-NQO的配置：
用無(wú)菌蒸餾水配成0.1%濃度, 置于4 ℃冰箱避光保存, 用時(shí)以自來(lái)水配成300 mg/L置于避光瓶?jī)?nèi)自由飲用。
造模方法：
1、實(shí)驗(yàn)組68只小鼠為例：300 mg/L 4-NQO飲水喂養(yǎng)8～20周, 后改用自來(lái)水喂養(yǎng)至40周, 實(shí)驗(yàn)第9～40周每2周隨機(jī)處死4只；
2、對(duì)照組34只小鼠, 自來(lái)水喂養(yǎng), 實(shí)驗(yàn)第9～40周每2周隨機(jī)處死2只作為同期對(duì)照。
造模成功的指標(biāo)：
1. 肉眼觀察：小鼠精神狀況、活動(dòng)度、進(jìn)食、飲水量、飲藥量及毛色情況, 每周記錄小鼠體質(zhì)量, 飲水量, 飲藥量。每周掰開小鼠口腔觀察口腔內(nèi)變化, 記錄口腔內(nèi)黏膜色澤, 質(zhì)地等是否改變, 是否有斑塊、潰瘍或腫物出現(xiàn)。
2. H&E染色觀察：處死小鼠后立即取全舌、牙齦、口底、頰、腭、唇、頜下淋巴結(jié)、頜下腺、食管、胃、肝、脾、肺、腎、小腸、大腸等組織，進(jìn)行H&E染色，做病理學(xué)觀察。
3. 免疫組化廣譜細(xì)胞角蛋白 (pan-ck) 染色觀察，pan-ck兔抗鼠多克隆抗體在癌細(xì)胞內(nèi)為陽(yáng)性反應(yīng)。
應(yīng)用案例
圖2 小鼠口腔癌頜下淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移大體及組織病理學(xué)觀察（引用自：DOI:10.16190/j.ki.45-1211/r.2012.04.064）
A:28周時(shí)實(shí)驗(yàn)組一小鼠口底腫物 (黑色方框內(nèi)) ;B:小鼠口底腫物為鱗狀細(xì)胞癌 (HE×200) ;C:小鼠雙側(cè)頜下淋巴結(jié)腫大 (圖中黑色箭頭所指) ;D:淋巴結(jié)中已有轉(zhuǎn)移灶 ( (HE×200) ;E:淋巴結(jié)廣譜細(xì)胞角蛋白染色陽(yáng)性 (IHC×200)。
相關(guān)產(chǎn)品
分類 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
口腔癌動(dòng)物建模試劑 | 4-Nitroquinoline N-oxide 4-硝基喹啉-N-氧化物（4-NQO） | 60392ES72/80/90 | 250 mg/1/5 g |
YEASEN提供4-NQO純度≥98%
