一、概述

實時熒光定量 PCR 技術憑借其靈敏度高、特異性好和結果可量化的特性，已成為分子生物學及臨床檢測領域的基本工具。隨著科研項目預算壓力增大和實驗室升級需求增加，二手 qPCR 儀器的市場需求不斷增長。采購二手儀器不僅能有效控制成本，還可在短時間內補充實驗通量。本文將對市面上主流品牌及機型進行梳理，并就選購、驗收與維護要點提出參考意見。

二、主流品牌與代表機型

1. Roche（羅氏）

• 主要機型

• LightCycler 96／480 系列

• Cobas Z 480

• 特點簡述

• 兼容 96 孔和 384 孔板，可滿足中低及中高通量需求；

• 溫控均一性與靈敏度檢測經多家實驗室驗證；

• 軟件支持多種分析方法，包括 ΔΔCt、標準曲線法、熔解曲線分析和 SNP 分型；

• 可選配梯度模塊與自動化接口。

• 應用領域

• 基因表達研究、病原體快速檢測、基因分型、表觀遺傳學等。

2. Thermo Fisher Scientific（熱電/應用生物）

• 主要機型

• Applied Biosystems 7500／7500 Fast

• StepOne／StepOne Plus

• QuantStudio 系列（QS 3、QS 5、QS 6、QS 7、QS 12）

• 特點簡述

• 機型覆蓋從低通量到高通量，滿足多種實驗規模；

• QuantStudio 系列在軟件界面中增加多組學數據管理模塊；

• 兼容多種板式，包括 96 孔、384 孔、條管和芯片格式；

• 內置快速擴增程序，可在短于 30 分鐘內獲取初步定性結果。

• 應用領域

• 臨床診斷、藥物篩選、環境微生物檢測、食品安全監控等。

3. Bio-Rad（伯樂）

• 主要機型

• CFX96 Touch／CFX384 Touch

• CFX Opus 系列

• 特點簡述

• 模塊化設計，故障時可拆卸更換探測或溫控模塊；

• 數據分析軟件支持多維熱圖、3D 聚類等高級可視化；

• 樣本架采用金屬底盤加密封圈設計，增強溫度傳輸效率；

• 通訊接口包括 USB 與以太網，可接入 LIMS。

• 應用領域

• 基因表達定量、拷貝數變異、SNP 分型、高通量轉基因檢測等。

4. Qiagen（凱杰）

• 主要機型

• Rotor-Gene Q／Rotorgene Q MDx

• 特點簡述

• 旋轉式樣本架，通過連續旋轉實現孔間溫度均一；

• 適合小體積（≤10 µL）反應，可節省試劑；

• 軟件界面支持熔解曲線和 HRM（高分辨率熔解）分析；

• 設備體積較小，便于在有限空間內部署。

• 應用領域

• DNA 甲基化分析、快速病原體檢測、微生物多樣性研究等。

5. Agilent Technologies（安捷倫）

• 主要機型

• AriaMx

• Stratagene Mx3005P

• 特點簡述

• 多通道激發光源與光電二極管探測器組合；

• 支持 384 孔板格式，并兼容 96 孔和條管模式；

• 軟件包含標準曲線生成、定量 PCR 報告模板和批量導出功能；

• 通訊接口豐富，可實現遠程訪問與數據備份。

• 應用領域

• 轉基因農產品檢測、病毒載量監測、基因敲降實驗等。

6. Eppendorf（埃本）

• 主要機型

• Mastercycler ep Realplex／Realplex2

• 特點簡述

• 操作界面簡潔，上手較快；

• 溫控模塊與光學模塊分離設計，模塊更換方便；

• 支持中通量 96 孔板，部分型號可作梯度 PCR；

• 軟件輸出格式兼容主流文檔與圖像格式。

• 應用領域

• 基礎科研、小規模臨床檢測及教學實驗室等。

7. Takara Bio（塔克拉）

• 主要機型

• TP800／TP9600

• 特點簡述

• 機型針對分子生物學實驗室優化，對接多種試劑體系；

• 支持反轉錄一體化反應和快速 PCR 模式；

• 軟件中內置常用引物庫和試劑配方推薦；

• 價格相對合理，性價比與整機維護成本具競爭力。

• 應用領域

• miRNA 分析、cDNA 合成后定量、臨床快速篩查等。

8. Analytik Jena（雅納）

• 主要機型

• qTOWER 系列

• 特點簡述

• 提供單板、條管、芯片多種樣本支持方式；

• 用戶可在實驗中實時切換熒光通道；

• 軟件支持批量實驗管理、數據歸檔和報告定制；

• 設備維護簡便，耗材成本控制在合理范圍。

• 應用領域

• 環境監測、微生物定量、表觀遺傳學等。

9. 國產及區域品牌

• Sansure（圣湘）：SLAN-96P／SLAN-384P，主要面向臨床分子診斷市場，支持多重病原體檢測。

• Hengyi（恒逸）：Gentle 96／Gentle 384，聚焦高校及地方檢驗所，提供維護包與質控服務。

• GeneScript（金斯瑞）：部分型號整合核酸提取與 qPCR 功能，適合一站式實驗平臺。

三、選購與驗收要點

成本與預算考慮

1. 購置費用

• 二手 qPCR 儀器價格受機型、使用年限、配件完整性及保修條款影響，通常為全新設備的 40%–70%；

• 熱門機型（如 LightCycler 480、CFX96 Touch）因需求量大，二手價格相對穩定；

• 區域品牌及早期型號的折扣幅度更大，但需結合維護成本一并評估。

2. 運行成本

• 試劑耗材：低漂白孔板與專用封板膜單價較高，若年運行量大，可與耗材供應商協商批量折扣；

• 能耗：實時 qPCR 儀器功耗集中在溫控和光學系統，24 小時待機會增加電費支出；

• 維護保養：定期校準、光源更換及 Peltier 模塊檢修，建議預留年度維護預算的 5%–10%。

3. 折舊與殘值

• 實驗室財務可根據預計使用年限（通常為 5 年）線性折舊；

• 維護完好、定期校準的設備在未來轉售時，殘值可保持在購置價的 30% 左右。

4. 綜合評估

• 將購置費、運行成本、維護費和潛在殘值合并計算全生命周期成本（LCC），以便在多款備選機型中做出決策；

• 對于預算緊張且通量需求中等的實驗室，二手機型與全新中低端機型的 LCC 往往相近，可靈活權衡。

八、法規及認證要求

1. 質量管理體系

• 實驗室若需通過 ISO 17025、ISO 15189 或 GLP/GMP 認證，二手設備必須出示最近一次校準報告及維護記錄；

• 建議與賣方簽訂設備性能保證協議，明確設備核心部件的質保范圍和響應時間。

2. 生物安全和數據安全

• 設備上運行的 qPCR 軟件應符合實驗室信息管理系統（LIMS）接口規范，包含用戶權限管理與操作日志記錄；

• 如用于病原體檢測，須確保樣本處理區域與設備擺放區域符合生物安全柜操作規范，避免交叉污染。

3. 軟件與固件合規

• 二手儀器的軟件授權需合法轉讓，并保證后續升級與補丁支持；

• 符合國家及地區的數據保護法規（如 GDPR、HIPAA）要求的數據加密與備份機制。

九、未來發展趨勢

1. 微流控與數字 PCR 整合

• 越來越多的 qPCR 平臺在設計時考慮與微流控芯片或數字 PCR 模塊兼容，以提升靈敏度并降低反應體系體積；

• 二手儀器若支持外接芯片模塊，可在常規 qPCR 基礎上開展更精細化的數字定量研究。

2. 自動化與機器人對接

• 實驗室自動化程度提高，液體處理機器人與 qPCR 儀對接成為常態；

• 選購二手設備時，應預留機械臂抓取板架的空間和接口，以減少手動操作誤差。

3. 數據分析云端化

• 趨勢向云平臺遷移，數據存儲與分析在網絡環境下完成；

• 支持云端分析的軟件授權與網絡安全合規將成為二手設備評估的重要指標。

4. 熒光染料譜系擴展

• 新一代熒光探針和染料不斷推出，能夠實現更多重檢測和更低背景信號；

• 二手設備的濾光片和光源是否可升級或更換，將影響未來實驗拓展能力。

十、結語

在選購二手實時熒光定量 PCR 儀器時，品牌、機型和核心性能指標只是決策的一部分。結合實驗室的通量需求、預算規劃、維護能力以及未來技術路線，才能確保設備在整個使用周期內保持穩定運行，產出可靠數據。通過詳盡的驗收測試和完善的售后協議，二手 qPCR 儀同樣能夠為基因表達分析、病原體檢測、表觀遺傳學研究等領域提供支持。希望本文對實驗室決策者在二手 qPCR 平臺選型、驗收與維護方面提供具體參考。若有更多具體機型或采購流程方面的問題，歡迎進一步咨詢。