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二手羅氏LightCycler® 480 II 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀優(yōu)勢(shì)

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    2025年05月24日
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杭州實(shí)了個(gè)驗(yàn)生物科技有限公司
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資料簡(jiǎn)介

二手羅氏 LightCycler® 480 II 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀詳盡介紹

一、引言

在分子生物學(xué)和臨床診斷領(lǐng)域,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)以其靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、可重復(fù)性強(qiáng)等特點(diǎn),成為核酸定量分析的主流方法之一。羅氏公司推出的 LightCycler® 480 II 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀是適用于中高通量檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備。隨著二手科研設(shè)備流通市場(chǎng)的成熟,該型號(hào)的二手儀器因其穩(wěn)定的性能和合理的價(jià)格,在科研、教學(xué)與第三方檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中仍具有較高使用價(jià)值。

本文將從系統(tǒng)組成、技術(shù)參數(shù)、功能特點(diǎn)、典型應(yīng)用、使用維護(hù)及選購(gòu)建議等方面,全面介紹二手羅氏 LightCycler® 480 II 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀的相關(guān)信息。


二、系統(tǒng)組成

二手 LightCycler® 480 II 系統(tǒng)主要包括以下幾個(gè)組成部分:

  1. 主機(jī)(熱循環(huán)系統(tǒng)與光學(xué)系統(tǒng)集成)
    搭載精確溫控模塊和多通道熒光檢測(cè)系統(tǒng),支持不同孔板類型。

  2. 樣本處理組件
    包括反應(yīng)板托盤(pán)、96孔或384孔反應(yīng)板、透明密封膜、離心適配器等。

  3. 控制與分析軟件
    LightCycler® 軟件(版本依儀器出售年份而定),用于實(shí)驗(yàn)設(shè)置、數(shù)據(jù)采集、熔解曲線分析等。

  4. 附件與外設(shè)
    如計(jì)算機(jī)工作站、電源線、USB接口電纜及光學(xué)校準(zhǔn)片等。


三、技術(shù)參數(shù)

項(xiàng)目技術(shù)指標(biāo)
孔板類型96孔、384孔反應(yīng)板
熒光檢測(cè)通道支持最多6色熒光通道
溫控范圍37 °C – 99 °C
升降溫速率最快可達(dá) 4.8 °C/秒
孔間溫度均一性±0.2°C(96孔),±0.4°C(384孔)
檢測(cè)靈敏度可檢測(cè)1~5個(gè)拷貝的DNA模板
支持染料SYBR Green I, TaqMan, MGB, FRET, Molecular Beacon等
分析功能Ct分析、相對(duì)定量、絕對(duì)定量、基因分型、HRM熔解分析等
軟件系統(tǒng)LightCycler® 軟件(具體版本取決于原始配置)

四、功能特點(diǎn)(以實(shí)際使用表現(xiàn)為基礎(chǔ))

1. 熱循環(huán)性能穩(wěn)定

采用高效的銀質(zhì)加熱模塊與熱電制冷技術(shù),控溫迅速、穩(wěn)定,在多孔反應(yīng)板中實(shí)現(xiàn)良好的溫度一致性。這一點(diǎn)對(duì)熒光定量PCR反應(yīng)的重復(fù)性和可信度至關(guān)重要。

2. 多通道熒光檢測(cè)

系統(tǒng)最多支持六種熒光信號(hào)的同時(shí)檢測(cè),便于多重PCR反應(yīng)開(kāi)展,可在單次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)基因靶標(biāo),提高實(shí)驗(yàn)效率。

3. 靈活的軟件分析平臺(tái)

軟件支持?jǐn)?shù)據(jù)實(shí)時(shí)采集、擴(kuò)增曲線展示、Ct值分析、標(biāo)準(zhǔn)曲線生成、熔解曲線比對(duì)、基因型分型、SNP分析等,用戶可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇不同的分析模塊。

4. 可適應(yīng)多種實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

該設(shè)備支持常規(guī)定量PCR、端點(diǎn)法定量、熔解曲線分析、高分辨率熔解(HRM)分析等,覆蓋從基因表達(dá)分析到單核苷酸多態(tài)性檢測(cè)(SNP)的多種研究需求。


五、典型應(yīng)用場(chǎng)景

1. 基礎(chǔ)生命科學(xué)研究

  • mRNA 表達(dá)量定量分析

  • 轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)研究

  • siRNA 敲減效應(yīng)驗(yàn)證

2. 醫(yī)學(xué)與臨床研究

  • 腫瘤相關(guān)基因突變檢測(cè)

  • 傳染病病原體核酸定量分析

  • 遺傳病檢測(cè)(如BRCA1/2突變、地中海貧血等)

3. 藥物篩選與毒理學(xué)評(píng)價(jià)

  • 藥物誘導(dǎo)的基因表達(dá)變化監(jiān)測(cè)

  • 細(xì)胞模型中藥效靶點(diǎn)基因分析

4. 食品與環(huán)境監(jiān)測(cè)

  • 轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)

  • 食源性病原菌如沙門(mén)氏菌、大腸桿菌的快速檢測(cè)

  • 水體或土壤中微生物負(fù)荷監(jiān)測(cè)


六、購(gòu)買(mǎi)二手設(shè)備的優(yōu)勢(shì)與風(fēng)險(xiǎn)提示

優(yōu)勢(shì):

  1. 成本節(jié)約:價(jià)格相較新機(jī)大幅降低,可顯著減少實(shí)驗(yàn)室預(yù)算支出。

  2. 性能依舊可靠:若原機(jī)使用規(guī)范、定期維護(hù),核心部件(如熱模塊與光學(xué)系統(tǒng))性能仍然穩(wěn)定。

  3. 快速部署:無(wú)需預(yù)定等待制造周期,交貨與上線周期短。

風(fēng)險(xiǎn)與注意事項(xiàng):

  1. 使用壽命評(píng)估:應(yīng)核實(shí)機(jī)器使用年限與通電時(shí)間,部分老舊設(shè)備需注意光源老化與溫控漂移問(wèn)題。

  2. 通道校準(zhǔn):確保所有熒光通道功能正常,校準(zhǔn)數(shù)據(jù)是否隨設(shè)備附帶提供。

  3. 軟件兼容性:需確認(rèn)舊版軟件能否安裝在當(dāng)前操作系統(tǒng)中,必要時(shí)需搭配老款工作站。

  4. 售后與配件:需明確二手設(shè)備是否提供技術(shù)支持與配件保障,或需額外采購(gòu)標(biāo)準(zhǔn)化組件。


七、使用與維護(hù)建議

1. 操作建議

  • 使用原廠推薦的反應(yīng)板與封膜,避免因耗材不兼容而影響檢測(cè)精度。

  • 建議進(jìn)行陰性對(duì)照、標(biāo)準(zhǔn)曲線、重復(fù)孔布置等以驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性。

  • 定期運(yùn)行光學(xué)檢測(cè)和溫控驗(yàn)證程序,確保信號(hào)準(zhǔn)確。

2. 日常維護(hù)

  • 每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后清理孔板托盤(pán)區(qū)域,避免熒光污染物積累。

  • 避免液體泄漏造成內(nèi)部腐蝕,實(shí)驗(yàn)區(qū)建議設(shè)置防溢托盤(pán)。

  • 每6~12個(gè)月進(jìn)行一次專業(yè)校準(zhǔn)和系統(tǒng)檢測(cè),延長(zhǎng)儀器壽命。


八、結(jié)語(yǔ)

羅氏 LightCycler® 480 II 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀自推出以來(lái),一直被廣泛應(yīng)用于多學(xué)科分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室。其穩(wěn)定的性能、多樣的檢測(cè)能力與兼容性使其在二手市場(chǎng)中仍具使用價(jià)值。通過(guò)規(guī)范操作與合理維護(hù),二手設(shè)備可繼續(xù)支持科研項(xiàng)目與檢測(cè)任務(wù),為用戶提供可靠的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。

對(duì)于預(yù)算有限、或作為教學(xué)與初步研究使用的實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō),選購(gòu)一臺(tái)狀態(tài)良好的二手 LightCycler® 480 II 是具有性價(jià)比的選擇。若搭配完善的技術(shù)支持與數(shù)據(jù)分析方案,該設(shè)備仍可在未來(lái)多年內(nèi)持續(xù)發(fā)揮作用。


免責(zé)聲明

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