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單抗抗體測序檢測技術服務詳情介紹
單克隆抗體(monoclonal antibody, mAb)質譜測序可用于詳細分析單克隆抗體的結構,包括其氨基酸序列、糖基化位點、氧化或還原修飾等。這種分析對于抗體的研發(fā)、質量控制以及機制研究至關重要。這種技術的主要應用是在生物醫(yī)藥領域,用于抗體藥物的開發(fā)、抗體的鑒定、以及研究免疫反應。
圖1.抗體測序示意圖
單抗抗體測序的過程通常分為以下幾步:
樣本準備是質譜分析的首要步驟,包括蛋白質純化、濃縮、去鹽、酶解(通常使用yídànbáiméi或其他特異性蛋白酶)等過程。這一步驟的目的是將復雜的生物樣品轉化為適合質譜分析的形式。
單克隆抗體的質譜分析可以通過多種技術進行,包括但不限于:
MALDI-TOF MS(基質輔助激光解吸/飛行時間質譜):適用于測量大分子如蛋白質和多肽的質量。
ESI-MS(電噴霧電離質譜):可以直接分析溶液中的蛋白質,適用于蛋白質復合物的分析,可以提供關于蛋白質大小、結構和亞單位組成的信息。
LC-MS/MS(液相色譜-串聯(lián)質譜):結合液相色譜分離和串聯(lián)質譜分析,適用于蛋白質混合物,特別是進行肽段級別的分析,提供氨基酸序列信息。
質譜數(shù)據(jù)的分析需要zhuānyè的軟件和算法,以識別蛋白質/肽段的質量、推斷氨基酸序列、確定糖基化位點和其他翻譯后修飾。數(shù)據(jù)分析可以揭示抗體的詳細分子結構信息,包括變異區(qū)(CDRs)的jīngquè序列,這對于理解其與抗原的結合特異性至關重要。
通過質譜技術,可以詳細分析單克隆抗體的關鍵特性,如:
翻譯后修飾:糖基化、磷酸化、氧化等。
變異和異質性:例如,由于不同的翻譯后修飾而產(chǎn)生的異質性。
序列一致性:確認生產(chǎn)過程中抗體的序列一致性和正確性。
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