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賽默飛QuantStudio™ 5實時熒光定量PCR儀介紹與選型指南

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    2025年05月20日
關鍵詞
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杭州實了個驗生物科技有限公司
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資料簡介

賽默飛QuantStudio™ 5實時熒光定量PCR儀介紹與選型指南

一、儀器概述

QuantStudio™ 5實時熒光定量PCR系統是Thermo Fisher Scientific推出的一款應用廣泛的熒光定量PCR平臺,適用于生命科學研究、疾病檢測、基因表達分析、突變檢測和微生物定量等多種場景。該系統延續了Applied Biosystems平臺在PCR檢測領域的技術積累,融合智能化軟件控制與精準的溫控系統,適合不同類型實驗室的科研與檢測需求。

Q5系統提供兩種規格型號:96孔標準孔板型和384孔高通量型,可兼容多種熒光染料與探針類型,具有靈活、可靠、易操作等優勢特點。通過精密的光學檢測系統與穩定的溫控模塊,保障實驗重復性與數據準確性。

二、核心技術參數

1. 熱循環模塊

  • 控溫精度:±0.25°C(典型值)

  • 溫度均一性:±0.4°C(在95°C下)

  • 升降溫速率:最大可達6.5°C/s

  • 支持快速與標準PCR程序:兼容標準與Fast PCR反應體系,靈活適應實驗周期安排

2. 熒光檢測系統

  • 激發與發射波長:基于LED激發與CCD檢測的多通道熒光系統,支持4通道與6通道版本

  • 支持染料類型:FAM、VIC、SYBR Green、ROX、TAMRA、Texas Red等

  • 背景校正與信號歸一化功能:提高數據的線性與動態范圍

  • 熒光采集方式:獨立每孔掃描,提高信號一致性與靈敏度

3. 軟件系統

  • 用戶界面:觸摸屏圖形化界面,支持中英文切換

  • 操作系統:兼容本地操作與遠程云端控制(Connect云平臺)

  • 數據輸出格式:支持Excel、PDF、CSV格式

  • 分析模塊:集成相對定量、絕對定量、SNP分型、HRM分析、標準曲線計算等功能

4. 硬件規格

  • 孔板類型:96孔(0.2 mL)、384孔(低體積)

  • 樣本通量:每輪反應可處理96或384個樣本

  • 尺寸與重量:約為27 kg,適合實驗臺面擺放

  • 通訊接口:USB、WiFi、Ethernet接口,便于數據導出與設備聯網

三、選型建議

在選擇Q5實時熒光定量PCR系統時,應結合實驗需求、預算水平、通量要求與操作人員的技術熟練度等因素進行綜合判斷。以下為常見選型依據:

1. 按實驗通量分類

  • 常規科研實驗室:推薦選擇96孔4通道系統,支持日常定量分析,價格適中,便于新手上手

  • 高通量檢測實驗室:建議使用384孔6通道版本,提高樣本處理效率,適合臨床實驗室與大規模篩查場景

  • 教學與初級研究場景:4通道Q5系統基本功能完善,便于演示和基礎訓練

2. 按應用類型分類

  • 基因表達分析:4通道系統足以滿足需求,搭配SYBR Green或探針法均可

  • 病毒載量檢測/病原體檢測:建議選配ROX校正染料通道,并結合標準品進行定量

  • SNP分型或熔解曲線分析(HRM):優先考慮6通道版本,支持更復雜的熒光通道匹配

3. 按實驗環境分類

  • 多地點共享平臺:可考慮Connect云平臺功能,便于多實驗室數據共享與遠程操作

  • 受限空間實驗室:Q5體積緊湊,可靈活部署在標準生物安全柜或PCR專用臺內

四、典型應用場景

1. 臨床科研

適用于病毒核酸檢測、腫瘤標志物表達分析、分子診斷方法開發等。配合商業化試劑盒,可用于呼吸道病毒(如流感、新冠病毒)核酸檢測方法的優化與驗證。

2. 動植物分子育種

可用于農作物品種篩選中的SNP標記分析、基因表達量評估等。常用于抗病性基因、轉基因標記基因的定量檢測。

3. 食品與環境安全檢測

通過定量PCR技術檢測轉基因成分、致病菌含量、水體中污染物微生物指標,輔助食品安全與環境監測工作。

4. 基礎生命科學研究

用于RNA干擾實驗結果驗證、基因剪切效率評估、mRNA表達譜分析等。可結合逆轉錄PCR與相對定量方法進行轉錄組局部驗證。

五、操作流程簡述

  1. 試劑準備:根據實驗需求選擇SYBR Green法或探針法反應體系,配制反應液

  2. 模板加樣:在無RNA酶/無DNA酶污染的環境中操作,保證樣本穩定性

  3. 程序設置:使用軟件設置PCR反應參數,包括變性、退火、延伸步驟及熒光采集頻率

  4. 數據分析:完成運行后自動生成Ct值、標準曲線與相對表達結果,支持圖表導出與批量處理

六、維護與校準

為保持系統性能穩定,應定期進行以下操作:

  • 更換或清潔光學模塊過濾片(根據使用頻次)

  • 校準溫控模塊與熒光通道(建議每半年)

  • 維護系統風扇與散熱通道,防止溫控失準

  • 更新軟件版本與系統固件,保證數據兼容性

七、Q5與其他型號比較

參數/型號QuantStudio 3QuantStudio 5QuantStudio 7 Pro
最大通量96孔96/384孔384孔
通道數量4通道4或6通道6通道
云端控制不支持支持Connect支持ProLink
用戶界面彩屏觸摸彩屏觸摸自動門設計+屏幕
自動化兼容性支持部分選配支持高通量自動化

八、采購與使用建議

  1. 注意廠商授權與服務網點:建議通過正規渠道采購帶有質保的設備,可確保軟件升級、售后維修、校準服務等權益。

  2. 結合實驗預算配套購買試劑與耗材:包括熒光探針、96孔板、光學密封膜等,部分型號需配ROX校正染料。

  3. 提前培訓使用人員:熟練掌握樣品準備、程序設定與異常故障排查流程,有助于提高實驗效率與結果可靠性。

  4. 與LIMS系統或數據庫對接:大型實驗室可考慮通過API或導出功能對接實驗室信息管理系統,實現數據歸檔。


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