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活力染色技術(shù)2022/5/19

一、實驗原理各種細胞操作，包括傳代、凍存和原代組織的分離，均能導(dǎo)致細胞死亡。為了確定群體細胞中的存活細胞數(shù)，可采用臺盼藍染料排斥實驗（Phillips1973)。正常的健康細胞能排斥染料，但細胞膜完整...

細胞轉(zhuǎn)染技術(shù)2022/5/19

一、細胞轉(zhuǎn)染細胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA，RNA等導(dǎo)入真核細胞的技術(shù)。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染兩大類。本實驗室主要是質(zhì)粒轉(zhuǎn)染、miRcroRNA轉(zhuǎn)染、慢病毒轉(zhuǎn)染、藥物轉(zhuǎn)染、多肽轉(zhuǎn)染等。二...

流式細胞術(shù)檢測細胞周期2022/5/19

流式細胞術(shù)檢測細胞周期1。實驗原理用流式細胞儀檢測細胞周期，通常用碘化丙啶（propidiumiodide，PI）染細胞核。PI在一定波長的光下發(fā)出熒光，其強度與DNA含量成正比。通過流式細胞儀分析各...

一般慢性炎癥的基本病理變化2022/5/14

1、炎癥灶內(nèi)主要是巨噬細胞、淋巴細胞和漿細胞浸潤。單核吞噬細胞的浸潤對慢性炎癥十分重要。單核細胞從血管游出后轉(zhuǎn)化為巨噬細胞。巨噬細胞還可被激活。在炎癥灶局部巨噬細胞的積聚有三方面的原因：①由于從炎癥灶...

激光掃描共聚焦顯微鏡操作步驟及注意事項2022/5/14

激光掃描共聚焦顯微鏡可測定的樣品種類很多．包括生物材料、組織(切片)、細胞(亞細胞)結(jié)構(gòu)等。樣品中熒光的來源主要有如下幾種：自發(fā)熒光(autofluorescence)、熒光染色、免疫熒光、熒光蛋白、...

人非小細胞肺癌裸鼠原位種植轉(zhuǎn)移模型的建立實驗2022/5/14

人非小細胞肺癌裸鼠原位種植轉(zhuǎn)移模型的建立：（1）探討肺癌遠處轉(zhuǎn)移和阻斷其遠處轉(zhuǎn)移的研究；（2）模擬晚期非小細胞肺癌轉(zhuǎn)移的自然發(fā)生過程；（3）在活體動物的完整器官內(nèi)評估瘤細胞播散和腫瘤的生長。實驗方法原...

人胃癌高轉(zhuǎn)移模型2022/5/14

人胃癌高轉(zhuǎn)移模型的建立可以：（1）研究腫瘤轉(zhuǎn)移機制；（2）研究腫瘤防治；（3）為腫瘤轉(zhuǎn)移研究提供更為理想的動物模型。腫瘤組織塊原位移植法實驗方法原理用人胃癌組織塊SGC-7901原位移植于SCID小鼠...

人胰腺癌裸小鼠模型2022/5/14

人胰腺癌裸小鼠模型實驗方法原理將人胰腺癌細胞株8988接種于裸鼠腋窩處皮下，每周測量腫瘤大小，第42d處死小鼠。腫瘤組織及相關(guān)臟器送病理及電鏡檢查，放射免疫法檢測相關(guān)抗原。皮下腫瘤組織細胞及細胞株培養(yǎng)...

多重 PCR 擴增實驗2022/5/7

試劑、試劑盒Taq聚合酶溶于水的DNA引物儀器、耗材熱循環(huán)儀實驗步驟一、材料1.酶和酶緩沖液Taq聚合酶許多Taq聚合酶都可以用；作者發(fā)現(xiàn)Roche公司的Taq聚合酶可以滿足大多數(shù)需要.如果需要提高P...

免疫熒光實驗方法中需要注意的環(huán)節(jié)2022/5/7

免疫熒光方法中的重要環(huán)節(jié):1、冰凍切片制備：建議用新鮮組織，否則組織細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)破壞，易使抗原彌散。選用干凈鋒利的刀片、組織一定要冷凍適度等，防止裂片和脫片嚴重。2、組織切片固定：切好片風干后立即用冰...

組織切片的免疫熒光標記實驗2022/5/7

免疫熒光標記技術(shù)（immunofluorescencetechnique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應(yīng)的抗原或抗體起反應(yīng)時，在形成的復(fù)合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就...

腫瘤細胞體外傳代培養(yǎng)及保種2022/5/7

一.細胞復(fù)蘇與培養(yǎng)將液氮或-80℃保存的腫瘤細胞于37℃水浴，快速溶化，用8.0ml培養(yǎng)基混勻已融化的腫瘤細胞懸液，于1500轉(zhuǎn)/分，離心3分鐘。棄上清，再吸取8.0ml培養(yǎng)基質(zhì)混勻細胞沉淀，再150...

懸浮細胞的免疫熒光標記實驗2022/5/7

免疫熒光標記技術(shù)（immunofluorescencetechnique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應(yīng)的抗原或抗體起反應(yīng)時，在形成的復(fù)合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就...

成年小鼠的灌流實驗2022/4/30

進行實驗動物灌流是獲得良好的形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果以及保存腦、腎、心臟和其他許多器官所必需的。對于未經(jīng)訓(xùn)練的實驗人員，初次進行灌流可能會失敗，故建議首先用一些對照實驗動物練習(xí)，以熟悉此過程。基本方案實驗材料小...

實驗動物的取血標準操作規(guī)程(SOP)2022/4/30

名稱：實驗動物的取血關(guān)鍵詞：動物,取血,方法目的：規(guī)范實驗動物(家兔、狗，豚鼠)取血的方法和途徑,主體內(nèi)容：（一）家兔1．耳緣靜脈取血法選好耳緣靜脈，拔去被毛，用二甲苯或酒精涂擦局部，小血管夾夾緊耳根...