天然有機(jī)物（如蛋白質(zhì)和氨基酸等化合物）的總氮量通常用微量凱氏定氮法（micro-kjeldahl method）來測定。
當(dāng)被測的天然含氮化合物與濃硫酸共熱時(shí)分解出氨，氨與硫酸反應(yīng)生成硫酸銨，此過程稱為消化。由于消化過程進(jìn)行緩慢，實(shí)驗(yàn)中常添加硫酸鉀和硫酸銅的混合物來促進(jìn)，硫酸銅是催化劑，硫酸鉀可提高消化液的沸點(diǎn)。氧化劑過氧化氫也能加速反應(yīng)。消化完成后，在凱氏定氮儀中加入強(qiáng)堿堿化消化液，使碳酸銨分解出氨。用水蒸汽蒸餾法將氨蒸入無機(jī)酸溶液中，然后再用標(biāo)準(zhǔn)酸溶液進(jìn)行滴定。
上述過程的化學(xué)反應(yīng)如下：
在微量凱氏定氮法中，常用硼酸-指示劑混合液收集氨，氨與溶液中氫離子結(jié)合生成銨離子，使溶液中氫離子濃度降低，指示劑顏色發(fā)生改變，然后用標(biāo)準(zhǔn)無機(jī)酸滴定，直至恢復(fù)溶液中原來氫離子濃度，即指示劑變回原來顏色為止。所用無機(jī)酸的摩爾數(shù)即相當(dāng)于樣品中氨的摩爾數(shù)，本法適用范圍約為0.2~1mg氨。
因?yàn)榈鞍踪|(zhì)含氮量通常在16%左右，所以將凱氏定氮法測得的含氮量乘上系數(shù)6.25，便得到該樣品的蛋白質(zhì)含量。
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