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胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）是細胞代謝中的關鍵酶，催化異檸檬酸脫氫脫羧生成 α-酮戊二酸，同時生成 NADPH。CheKine™ 胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）活性檢測試劑盒（微量法）以其精準、高效的檢測性能，為科研人員提供了一種理想的工具，助力深入探究 ICDHc 在細胞代謝、氧化還原調控及疾病機制中的關鍵作用。

ICDHc 的生理功能與作用機制

NADPH 生成的關鍵途徑

ICDHc 在細胞質中催化異檸檬酸脫氫脫羧反應，生成 α-酮戊二酸和 NADPH。NADPH 是細胞內重要的還原型輔酶，為脂肪酸、膽固醇等生物合成提供還原力，同時維持細胞的氧化還原平衡，抵御氧化損傷。

代謝調控的核心節點

ICDHc 的活性受到多種因素的精細調控，包括底物濃度、 allosteric 效應和共價修飾等。在細胞應對氧化應激、快速增殖等生理狀態時，ICDHc 活性上調，增加 NADPH 的生成，滿足細胞的合成代謝和抗氧化需求。

ICDHc 與疾病的關系

氧化應激與抗氧化防御

ICDHc 提供的 NADPH 是細胞抗氧化防御系統的重要組成部分。在氧化應激條件下，ICDHc 活性增強，促進 NADPH 生成，為谷胱甘肽還原酶等抗氧化酶提供還原力，清除活性氧（ROS），減輕氧化損傷。ICDHc 功能缺陷可能導致細胞抗氧化能力下降，增加氧化損傷相關疾病的風險。

代謝性疾病

在糖尿病、肥胖癥等代謝性疾病中，ICDHc 活性異常影響脂質代謝和胰島素信號通路。研究表明，ICDHc 活性降低可能導致 NADPH 生成不足，影響脂肪酸合成和代謝調控，加劇胰島素抵抗和脂毒性。

CheKine™ ICDHc 活性檢測試劑盒（微量法）工作原理

CheKine™ 胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）活性檢測試劑盒采用比色法原理，利用 ICDHc 催化異檸檬酸和 NADP?生成 NADPH。NADPH 在 340 nm 處具有特征性吸光度，通過分光光度計測量吸光度值的變化，即可定量評估 ICDHc 的活性。該試劑盒操作簡便、靈敏度高、特異性強，適用于多種生物樣本，包括動植物組織、細胞培養物和血清等。

試劑盒應用與研究案例

氧化應激研究

在氧化應激研究中，ICDHc 活性檢測可用于評估細胞的抗氧化能力。例如，在研究氧化劑對細胞損傷模型的影響時，檢測細胞中 ICDHc 活性發現，活性顯著降低，表明氧化劑抑制了 ICDHc 的活性，導致 NADPH 生成減少，細胞抗氧化能力下降。通過抗氧化劑干預后，ICDHc 活性恢復，驗證了抗氧化劑的保護作用。

代謝性疾病研究

在代謝性疾病研究中，ICDHc 活性檢測可用于探究疾病機制和篩選藥物。例如，在高脂飲食誘導的肥胖小鼠模型中，檢測肝臟組織中 ICDHc 活性發現，活性顯著降低，伴隨著脂質代謝紊亂和胰島素抵抗。通過使用代謝調節劑，ICDHc 活性恢復，脂質代謝和胰島素敏感性得到改善，為代謝性疾病治療提供了潛在策略。

操作使用要點

樣本準備與處理

對于動植物組織樣本，需準確稱量后，利用適當的緩沖液進行勻漿處理，確保細胞充分破裂釋放 ICDHc。細胞培養物和細菌樣本則需通過離心收集細胞，用預冷的緩沖液洗滌并制成勻漿。血清樣本需避免溶血和反復凍融，以確保檢測結果的準確性。

檢測步驟

嚴格按照試劑盒說明書的操作步驟執行。首先將樣本和標準品加入反應體系，隨后依次加入檢測試劑，包括異檸檬酸、NADP?和其他輔助試劑，充分混勻后在特定溫度下孵育。孵育完成后，使用分光光度計在 340 nm 波長下測量吸光度值，并依據標準曲線計算 ICDHc 的活性。

質量控制與結果分析

每次檢測應設置空白對照、陰性對照和陽性對照，以確保檢測結果的準確性。對已知濃度的標準品進行重復檢測，計算其變異系數（CV），一般要求 CV 控制在一定范圍內，如小于 10%，以確保數據的穩定性和重復性。

試劑盒選擇要點

檢測原理與方法對比

目前市面上有多種 ICDHc 活性檢測試劑盒，采用不同的檢測原理，如比色法、熒光法等。CheKine™ 試劑盒采用的比色法具有操作簡便、成本較低、檢測快速等優點，適合大多數實驗室常規使用。熒光法具有更高的靈敏度和特異性，但需要配備熒光光度計。因此，在選擇試劑盒時，應根據實驗室設備條件、實驗需求以及對檢測靈敏度和速度的要求，綜合考慮檢測原理的適用性。

樣本類型與適用范圍

CheKine™ 試劑盒適用于多種生物樣本，包括動植物組織、細胞培養物和血清等。在購買前，務必仔細閱讀試劑盒說明書，確保其與所檢測的樣本類型相匹配，以保證檢測結果的準確性和可靠性。

靈敏度與檢測范圍評估

試劑盒的靈敏度和檢測范圍是影響檢測結果準確性的關鍵因素。CheKine™ 試劑盒具有較寬的檢測范圍和較高的靈敏度，能夠檢測到樣本中較低濃度的 ICDHc 活性變化。在選擇試劑盒時，應了解其檢測靈敏度和范圍，并結合實驗中預期的樣本 ICDHc 活性水平進行選擇。若試劑盒靈敏度不足，可能導致低濃度 ICDHc 樣本的檢測結果不準確或假陰性，從而影響對代謝狀態或疾病機制的評估。

試劑盒品質與穩定性考量

選擇質量可靠、穩定性好的 ICDHc 活性檢測試劑盒對于保證檢測結果的準確性和重復性至關重要。在購買前，可通過查看試劑盒的用戶評價、相關文獻引用情況以及生產廠家的信譽和資質等信息，對試劑盒的質量和性能進行全面評估。該產品經過嚴格的質量控制和性能驗證，具有良好的穩定性和批次間一致性，能夠為科研人員提供穩定可靠的檢測結果。同時，注意試劑盒的保存條件和有效期，嚴格按照說明書要求進行保存和使用，以確保試劑的活性和性能不受影響。