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重組蛋白獲得的途徑有哪些？
閱讀：624 發(fā)布時間：2023-4-24
重組蛋白的產(chǎn)生是應(yīng)用了重組DNA或重組RNA的技術(shù)從而獲得的蛋白質(zhì)。把蛋白中活性強(qiáng)的基因片段截取克隆出來，再導(dǎo)入到受體細(xì)胞中進(jìn)行不斷繁殖，表達(dá)出來的蛋白再進(jìn)行分離純化，就可以得到重組蛋白。重組蛋白的活性會比普通的蛋白更強(qiáng)些。按功能分可分為以下幾種：白細(xì)胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子、集落刺激因子、生長因子、趨化性細(xì)胞因子：
重組蛋白的獲得途徑：
重組蛋白需要通過表達(dá)系統(tǒng)制備，可以通過體外法和體內(nèi)法獲得。這兩種方法的前提是應(yīng)用基因重組技術(shù)，獲得與可翻譯成目的蛋白的基因片段相連的重組載體，然后將其轉(zhuǎn)移到可表達(dá)目的蛋白的宿主細(xì)胞中表達(dá)特定的重組蛋白分子。
體外生產(chǎn)重組蛋白主要包括四大系統(tǒng):原核蛋白表達(dá)(常用的大腸桿菌蛋白表達(dá))、哺乳動物細(xì)胞蛋白表達(dá)(常用細(xì)胞CHO、HEK293)、真核表達(dá)系統(tǒng)(酵母)和昆蟲細(xì)胞蛋白表達(dá)。合適的表達(dá)系統(tǒng)的選擇取決于重組蛋白的特性、重組蛋白的預(yù)期應(yīng)用以及系統(tǒng)是否能產(chǎn)生足夠的蛋白質(zhì)。根據(jù)其下游應(yīng)用選擇合適的蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)，提高表達(dá)成功率。