重組蛋白的相關介紹
閱讀:616 發布時間:2022-11-25
重組蛋白的產生是應用了重組DNA或重組RNA的技術從而獲得的蛋白質。在知道編碼該蛋白的基因序列之后,人工克隆該基因進入質粒。然后再把質粒轉染如大腸桿菌。這樣大腸桿菌就成了蛋白表達的工廠。表達出來的蛋白再進過分離純化,就是重組蛋白。
重組蛋白的產生是應用了重組DNA或重組RNA的技術從而獲得的蛋白質。體外重組蛋白的生產主要包括四大系統:原核蛋白表達,哺乳動物細胞蛋白表達,酵母蛋白表達及昆蟲細胞蛋白表達。生產的蛋白在活性和應用方法方面均有所不同。根據自身的下游運用選擇合適的蛋白表達系統,提高表達成功率。
重組蛋白有三種較為廣泛使用的表達系統,即大腸桿菌表達系統、酵母表達系統和CHO細胞表達系統。其中,大腸桿菌是表達重組蛋白較常用的宿主菌,已應用于許多具有重要藥用價值的蛋白質的生產。
大腸桿菌表達系統具有生長速度快、培養成本低、遺傳背景清晰、易于實現高密度培養等優點。大腸桿菌DH5α是一種突變株,主要表現為對外來DNA缺乏免疫力。大腸桿菌DH5α是基因工程中常用的宿主菌之一。與正常菌株相比,它缺乏某種免疫機制。