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重組蛋白是應(yīng)用重組DNA或重組RNA的技術(shù)，從而獲得具有一定功能和活性的蛋白質(zhì)，是研究生物學(xué)過程的重要工具，被廣泛應(yīng)用于蛋白結(jié)構(gòu)研究、細(xì)胞功能試驗(yàn)、免疫檢測(cè)試劑、重組蛋白藥物、診斷試劑開發(fā)等眾多領(lǐng)域。 

 

體外重組蛋白的生產(chǎn)主要包括四大系統(tǒng)：原核蛋白表達(dá)，哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá)，酵母蛋白表達(dá)及昆蟲細(xì)胞蛋白表達(dá)。

 

重組蛋白表達(dá)系統(tǒng)介紹：

 

（1）目前應(yīng)用較廣泛的表達(dá)系統(tǒng)有三大類，大腸桿菌(Esherichia coli)表達(dá)系統(tǒng)、酵母表達(dá)系統(tǒng)、CHO細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)。其中，大腸桿菌是表達(dá)重組蛋白常用的宿主菌，已應(yīng)用于許多具有重要藥用價(jià)值蛋白的生產(chǎn)。大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)具有許多優(yōu)點(diǎn)，如生長(zhǎng)快、培養(yǎng)成本低、遺傳背景清楚和易實(shí)現(xiàn)高密度培養(yǎng)等。大腸桿菌DH5α是一種誘變菌株，主要表現(xiàn)對(duì)外源DNA的免疫缺乏。大腸桿菌DH5α是基因工程常用的宿主菌之一，相比于正常菌種缺少了一定的免疫機(jī)制。

 

（2）不同的表達(dá)系統(tǒng)和培養(yǎng)方法顯著影響下游的處理過程，目標(biāo)蛋白表達(dá)是否形成包涵體，目標(biāo)蛋白表達(dá)的定位（胞內(nèi)、細(xì)胞膜內(nèi)、周質(zhì)空間和胞外），蛋白表達(dá)的量都依賴于所選擇的的表達(dá)系統(tǒng)。