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葉綠素含量單位是什么?葉綠素含量測(cè)定用什么儀器?

閱讀:7658        發(fā)布時(shí)間:2022-6-2

葉綠素含量單位是什么?葉綠素含量測(cè)定用什么儀器?

       葉綠素含量是指示作物葉片營(yíng)養(yǎng)的關(guān)鍵性指標(biāo),因此在生理生態(tài)研究中,測(cè)定植物葉綠素含量非常重要,本文主要介紹葉綠素含量單位是什么?葉綠素含量測(cè)定用什么儀器?以及葉綠素含量測(cè)定方法詳細(xì)介紹。 

       1、葉綠素含量單位是什么?

       在文獻(xiàn)中常見(jiàn)的葉綠素含量單位有兩種:一是以單位葉面積表示的,二是以單位葉片鮮重表示的。比較起來(lái),還是以單位葉面積表示的較為合理、適用,因?yàn)樗皇苋~片含水量變化的干擾,而且也便于與以單位葉面積表示的光合速率聯(lián)系起來(lái)分析兩者關(guān)系。以單位葉片鮮重表示的葉綠素含量尤其不適用于不同生長(zhǎng)光強(qiáng)、不同供水條件下生長(zhǎng)的植物材料。在以單位葉面積表示的葉綠素含量相同時(shí),如果以單位葉片鮮重表示,含水量高的葉片葉綠素含量值會(huì)低于那些含水量低的葉片。在水分脅迫條件下,這種偏差尤其大。

       在使用儀器測(cè)定葉綠素含量時(shí),葉綠素含量單位一般為SPADSoil and plant analyzer develotrnent),土壤與作物分析開(kāi)發(fā),實(shí)際指的是一種測(cè)量濃度的方法,是日本人發(fā)明的,葉綠素含量SPAD,就是指用SPAD這種方法測(cè)量的葉綠素濃度。 

       2、葉綠素含量測(cè)定用什么儀器?

       葉綠素含量測(cè)定是可以直接使用儀器測(cè)定的,用的儀器主要就是葉綠素含量測(cè)定儀,它通過(guò)測(cè)定植物的SPAD值含量,來(lái)表示葉片的綠色程度。 

       3、葉綠素含量測(cè)定方法詳細(xì)介紹

       3.1、實(shí)驗(yàn)原理

       葉綠素有葉綠素a和葉綠素b兩種類(lèi)型。葉綠素a、葉綠素b的內(nèi)酮提取液在紅光區(qū)波長(zhǎng)663nm645nm處分別具有zui大吸收峰。在波長(zhǎng)663nm處,葉綠素a、葉綠素b80丙酮提取液的吸光系數(shù)分別為82.049.27,在波長(zhǎng)645nm處測(cè)分別為16.7545.60。根據(jù)加和性原則,可得出葉綠素溶液在波長(zhǎng)663nm645nm處的吸光度AwAo1s與葉綠素溶液中葉綠素a和葉綠素b的質(zhì)量濃度papb(mg/L為單位)的關(guān)系,推導(dǎo)出Amon計(jì)算公式。

圖片1.png

 


       papb相加即得葉綠素總量P

圖片2.png

    

       此外,葉綠素a、葉綠素b在波長(zhǎng)652nm處吸收峰相交,兩者有相同的吸光系數(shù),均為34.5。因此,葉綠素總量還可在652um處測(cè)定:

圖片3.png

 

       因此,根據(jù)葉綠素的丙酮提取液對(duì)可見(jiàn)光譜的吸收特性,利用分光光度計(jì)在相應(yīng)波長(zhǎng)處測(cè)定提取液的吸光度值,按照前面的公式就可以計(jì)算出提取液中葉綠素的含量。再根據(jù)果蔬樣品質(zhì)量和提取液的體積,可以計(jì)算出果蔬組織中葉綠素的含量。

 

       3.2、實(shí)驗(yàn)步驟

       (1)稱(chēng)取1.0g果蔬樣品放入研缽中,加少量石英砂和碳酸鈣粉及2~3mL80丙酮溶液,研成勻漿,再加10mL80丙酮溶液繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3~5min提取。

       (2)取一張濾紙,折疊后置于漏斗中,用80丙酮潤(rùn)濕,沿玻璃棒將提取液倒入漏斗中,過(guò)濾到50mL棕色容量瓶中,沖洗研缽、研棒和殘?jiān)鼣?shù)次,zui后連同殘?jiān)?/span>--起倒人漏斗中,用丙酮溶液沖洗,直至濾紙和殘?jiān)袩o(wú)綠色為止。

       (3)zui后用80丙酮溶液定容至50mL,搖勻。注意,各器皿、用具在使用之前80丙酮溶液潤(rùn)洗。

       (4)按前面的Amon公式計(jì)算得提取液中葉綠素a和葉綠素b的質(zhì)量濃度,再按下式計(jì)算果蔬組織中葉綠素的含量,以每克果蔬組織鮮重中所含葉綠素的質(zhì)量表示,即mg/g。計(jì)算公式:

圖片4.png

 

        式中p一由公式計(jì)算得葉綠素的質(zhì)量濃度,mg/LV一樣品提取液總體積,mLm—樣品質(zhì)量,g

 


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