冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C30-0分鐘→(-20°C30分鐘*)→-80°C16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽vaporphase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3°C至–80 °C以下，再放入液氮槽vaporphase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20°C不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

迅速解凍：
1.迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍，并要不斷的搖動(dòng)，使管中的液體迅速融化，時(shí)間控制在1分鐘左右
離心去除凍存液：
1．融解好的細(xì)胞迅速放進(jìn)離心機(jī)中，2000r/min 或者600g離心2min
2．吸棄上清液。
3．用4-5ml*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，吹打制成單細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度以5×105/ml為宜。
4．將復(fù)蘇好的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，將培養(yǎng)瓶放入37℃和5％CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)，8-24小時(shí)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng)，換液的時(shí)間由細(xì)胞生長(zhǎng)情況而定