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　細胞克隆形成實驗

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一、實驗介紹

　　細胞克隆形成率即細胞接種存活率，表示接種細胞后貼壁的細胞成活并形成克隆的數(shù)量。貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆，而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞。克隆形成率反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。

　　

二、實驗目的

　　1）通過對細胞處理后在細胞培養(yǎng)板上的克隆形成能力來提示處理后細胞的群體依耐性及增殖能力。

　　2）評價不同殺傷因素(藥物、基因等)對腫瘤細胞增殖能力或群體依賴性的敏感性;

　　3）評價細胞在體內成瘤性，癌細胞不一定都可以在體內成瘤，但若體外克隆能力越強，即表明體內成瘤性越強，算是一種模擬體內成瘤的體外實驗。

　　

三、實驗步驟

　　

四、實驗結果展示

　　

 

五、送樣運輸要求：

 

1 凍存細胞

凍存管寄送前，使用封口膜把凍存管口封嚴密，凍存管單獨用自封袋存放。干冰運輸。運輸時間在2天以內干冰用量在10kg，在2-4天，干冰用量在20kg。

2 活細胞

1. 使用T25瓶，瓶蓋無孔。

2. 生長狀態(tài)良好的細胞，細胞密度在30%-40%為宜，寄送前，移去瓶內舊培養(yǎng)基，添加新培養(yǎng)基至瓶頸部，保留微量空氣，擰緊瓶蓋，并用封口膜密封，瓶身用75%表面消毒，把瓶用無菌袋或自封袋包裝，然后放置在適當?shù)暮袃龋兄車妹藁ǖ茸龇勒鸱缐禾幚怼．敎囟鹊陀?/span>10度是要加保溫措施，如暖寶寶等。

3. 細胞培養(yǎng)條件備注完整，如培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度，FBS用量等。

4. 備注：運送時間原則在4天以內，如細胞生長速度快，則加入的培養(yǎng)基血清可以減半，細胞密度在20%-30%。