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細胞克隆形成實驗科學實驗技術服務介紹
閱讀:110 發(fā)布時間:2024-10-11細胞克隆形成實驗
一、實驗介紹
細胞克隆形成率即細胞接種存活率,表示接種細胞后貼壁的細胞成活并形成克隆的數(shù)量。貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆,而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞。克隆形成率反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。
二、實驗目的
1)通過對細胞處理后在細胞培養(yǎng)板上的克隆形成能力來提示處理后細胞的群體依耐性及增殖能力。
2)評價不同殺傷因素(藥物、基因等)對腫瘤細胞增殖能力或群體依賴性的敏感性;
3)評價細胞在體內成瘤性,癌細胞不一定都可以在體內成瘤,但若體外克隆能力越強,即表明體內成瘤性越強,算是一種模擬體內成瘤的體外實驗。
三、實驗步驟
四、實驗結果展示
五、送樣運輸要求:
1 凍存細胞
凍存管寄送前,使用封口膜把凍存管口封嚴密,凍存管單獨用自封袋存放。干冰運輸。運輸時間在2天以內干冰用量在10kg,在2-4天,干冰用量在20kg。
2 活細胞
使用T25瓶,瓶蓋無孔。
生長狀態(tài)良好的細胞,細胞密度在30%-40%為宜,寄送前,移去瓶內舊培養(yǎng)基,添加新培養(yǎng)基至瓶頸部,保留微量空氣,擰緊瓶蓋,并用封口膜密封,瓶身用75%表面消毒,把瓶用無菌袋或自封袋包裝,然后放置在適當?shù)暮袃龋兄車妹藁ǖ茸龇勒鸱缐禾幚怼.敎囟鹊陀?/span>10度是要加保溫措施,如暖寶寶等。
細胞培養(yǎng)條件備注完整,如培養(yǎng)基,培養(yǎng)溫度,FBS用量等。
備注:運送時間原則在4天以內,如細胞生長速度快,則加入的培養(yǎng)基血清可以減半,細胞密度在20%-30%。