推薦一個SVEAOPAL色譜柱的通用沖洗流程
閱讀:799 發(fā)布時間:2020-1-27
使用后對SVEAOPAL色譜柱的沖洗保存也比較重要,使用了緩沖系統(tǒng)的尤其要注意。
這里推薦一個SVEAOPAL色譜柱的通用沖洗流程:
將所有通道置換成含有較低有機相比例的水相中,比如10-30%乙腈或甲醇,然后沖洗1個小時,然后再梯度增加有機相比例,各沖洗一定時間,保留在高有機相比例的沖洗液里。低有機相比例的沖洗液是為了盡可能地沖洗緩沖鹽。
通常低壓梯度洗脫的液相色譜儀采用的是四元泵,就是單泵四通道,比例閥混合。這種混合方式有個弊端,就是混合效果差,因為各通道不同比例是通過開關(guān)各通道閥的時間來控制的。
打比方乙腈:緩沖鹽=50:50,如果流速是1.0mL/min,并不是說乙腈和緩沖鹽以各0.5mL/min的流速來混合;而是流速一直是1.0mL/min,但是在往復泵一個來回的時間內(nèi),兩個通道分別打開一半的時間,也就是說系統(tǒng)管道里是一段乙腈、一段緩沖鹽。這樣就會造成鹽的析出。
所以,往往是兩通道混合,就算沒有用緩沖鹽,還是建議先按比例混合好了,然后走單通道,否則的話一樣會造成鹽析出,或者基線波動。
走梯度洗脫的話,往往會把有機相通道(B)中加入一定比例的水,或者把水相通道(A)配成梯度洗脫的初始比例,把有機相通道(B)配成梯度洗脫的比例。