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上一期文章我們總結了“物、化、生"三大類轉染法的優劣勢,總結如下:




本期我們將深入了解電穿孔法中,目前在Google Scholar已有42,100+篇文獻所提及的Nucleofector™技術,消化完本文后文末有答題活動,獎項豐富,為你的開學季更添助力!
前情提要
1998年,Nucleofector™技術由Amaxa公司開發(該公司于2008年被Lonza收購),并于2001年成為廣大科研人員可以使用的技術(Nucleofector™ I/II/IIb)。該技術基于電脈沖在細胞膜上瞬間產生小孔,綜合Lonza轉染體系(即細微差別的電脈沖條件和細胞特異性試劑的組合),使核酸底物可以直接進入細胞核,讓細胞的最高轉染效率可以達到99%,細胞轉染不依賴于細胞的增殖分裂。隨后,Lonza在2010年推出新一代電轉染系列4D Nucleofector™,并且在2021年推出第二代4D Nucleofector™核轉染平臺。
隨著系統生物學與交叉學科方法的應用,要求細胞和系統模型越來越接近體內細胞的功能。Nucleofector™技術就是為了嘗試從根本上解決細胞轉染效率與成活率問題,無論是原代細胞(干細胞、神經細胞、免疫細胞等),還是細胞系,每次都可重復出很高的轉染效率。
在Google Scholar用“Nucleofector"來檢索,已經有42,100+篇文獻提及Nucleofector™技術。檢索Nucleofector+“CRISPR",一共有12,800+篇,數量每日遞增中。
化學頂級綜述雜志Chemical Reviews文章對Nucleofection™技術的評價是:
Nucleofection™技術是有史以來電轉系統之一,于21世紀初問世,作為一種有效的細胞內遞送方法迅速獲得普及。
Lonza 4D Nucleofector™平臺從實際需求出發,開發了從低通量到高通量,小體積到大體積的電轉染,研發到生產規模的設備型號,保證從小體系篩選到大規模電轉的可行性和放大工藝可轉移。包括如下功能模塊并匹配對應應用方向:

并且只需5步簡單的操作方案,
即可實現輕松電轉!
4D-Nucleofector™ 核轉系統,除了電轉儀設備本身之外,還有不同細胞專屬的電轉試劑,可以支持在不同類型的細胞中都可以實現高效的,同時維持細胞功能的轉染結果。該系統改進了傳統金屬電極材質的電極杯,通過一種技術利用高分子導電聚合物穩定電脈沖發生的過程,避免金屬離子釋放對細胞本身帶來的金屬離子毒性影響。在Lonza BioscienceKnowledge Center里面呈現了超過700種即用型protocol(包括細胞培養,傳代、電轉準備、電轉方案、孵育方法以及優化方案)及海量的資料和應用FAQ(且一直在實際各地技術團隊的協作下不斷更新)。這也是Lonza電轉產品的又一個重要特色,讓大家在電轉系統的使用中輕松上手,實驗操作無憂。