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Simoa® 文獻 | Extracellular Vesicles (EV)應用方向最新文獻分享

2024-5-27  閱讀(179)

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自2016年起,Simoa®在細胞外囊泡領域共有50余篇文獻發表。本次,Quanterix團隊為您整理了其中6篇發表于2024年的文獻供您參考閱讀。

第1篇

Measuring EGFr on extracellular vesicles in human plasma samples


幾乎所有類型的細胞均會分泌細胞外囊泡(EV)到胞外,起到細胞間通訊的關鍵作用,并已成為疾病進展的有價值的指標。它們在癌癥診斷和監測方面的潛力尤其重要。表皮生長因子受體 (EGFr) 是多種癌癥的主要驅動因素,也是癌癥治療的重要靶點或共同靶點。本研究的目的是開發一種直接在血漿樣本中測量 EV 上 EGFr 的測定方法。此外還開發了三種測定法來測量血漿 EV 的總濃度。


由于EV 上預期的 EGFr 濃度較低,采用單分子陣列 (Simoa®) 技術開發了免疫測定法,與傳統免疫測定方法相比,該技術的靈敏度提高了 1000 倍。使用市售的校準材料和針對表面標記物(EGFr、CD9、CD63 和 CD81)的抗體開發四種測定法:CD81-EGFr、CD81-CD9、CD81-CD63 和 CD9-CD63。來自健康個體 (n=13) 和各種癌癥患者 (n=30,肺癌、結直腸癌、卵巢癌) 的小群體血漿樣本用于開發、驗證和測試。文章對每種測定方法均針對 EV 的稀釋線性、檢測限、分析變異和分析前穩定性進行了測試。與健康個體(中位數:663×106 EV EGFr/mL)相比,癌癥患者 EV 上的 EGFr 較低(中位數:489 × 106 EV EGFr/mL)。相反,與健康個體相比,癌癥患者血漿中的總 EV 濃度明顯較高(CD81-CD9:9157 vs 4088,CD81-CD63:3634 vs 1582,CD9-CD63:9538 vs 1210,中位值 x106 EV/mL)。總 EV 測定之間觀察到正相關(r=0.6,p<0.0001)。本研究所開發的檢測方法可以測量人血漿樣本中 EV 上的 EGFr 和總 EV,與健康個體相比,癌癥患者的 EV 總濃度大幅增加。這些檢測現已準備好使用大量癌癥樣本進行全面驗證。



第2篇

Specific binding of Alzheimer’s Aβ

peptides to extracellular vesicles


阿爾茨海默病 (AD) 是 65 歲及以上成年人的第五大死因,但人們對這種疾病的發病和進展知之甚少。淀粉樣蛋白(Aβ42)的存在決定了人們何時處于AD連續體。有趣的是,隨著AD的進展,血漿中可檢測到的 Aβ42 減少,這種現象被認為是由Aβ在大腦中聚集得更多,并且通過CSF從大腦轉運到血液導致。我們認為細胞外囊泡(EV)在這種運輸中發揮作用。 EV存在于血液、尿液和腦脊液等體液中,并攜帶多種生物活性分子“貨物"(例如蛋白質、核酸、脂質、代謝物),動態反映分泌EV的細胞的變化。


在這項工作中,為了確定 Aβ42 和 Aβ40 淀粉樣肽是否EV特異性結合,我們首先對血漿分離的囊泡進行了表征,以確認它們是 EV。在確認我們從血漿中分離出EV后,我們將它們與Aβ42或Aβ40一起孵育,然后使用單分子陣列 (SIMOA®) 對其進行分析。為了確定Aβ肽和EV之間相互作用的分子特異性和熱力學性質,我們通過等溫滴定量熱法 (ITC) 和 SIMO分析了Aβ肽和具有相同氨基酸組成但隨機序列的肽的結合。在基于滴定的方法中使用ITC揭示Aβ40或Aβ42與EV的飽和結合,并且 SIMOA® 測量證實。結果表明,Aβ與EV的相互作用比之前理解的更特異,這表明Aβ和EV相互作用在正常和病理條件下(如 AD)下都具有生理作用,并且這種與 EV 相關的淀粉樣蛋白具有作為 EV 相關淀粉樣蛋白的AD生物標志物的潛在效用。


第3篇

Comparison of plasma soluble and extracellular vesicles-associated 2 biomarkers in Alzheimer's Disease patients and

cognitively normal individuals


β 淀粉樣蛋白 (Aβ) 和 tau 蛋白是阿爾茨海默病 (AD) 的大腦標志,也作為可溶性生物標志物存在于血液中或封裝在細胞外囊泡 (EV) 中。我們的目標是評估 AD 病理學的可溶性血漿生物標志物與 EV 的數量和含量的相關性。


方法:Simoa®測定對一組APOE ε4– 和APOE ε4+ 認知正常個體 (CN) 和 AD 患者的血漿樣本和神經源性 EV (NDEV) 中的Aβ42/40和tau 進行定量。

結果:與CN個體相比,AD患者的可溶性血漿 Aβ42/40比率降低。各組之間血漿NDEV的數量和含量(Aβ40、Aβ42、tau)相似。僅在CN個體中,可溶性生物標志物的數量與NDEV數量呈負相關。


結論:可溶性 Aβ42/40比率是最穩健的AD血漿生物標志物。 NDEV及其內容物的分析指出了AD中 Aβ釋放的特殊機制。


第4篇

Endo-lysosomal dysfunction in neurodegenerative diseases: opinion on current progress and future direction in the use of exosomes as biomarkers


在過去的二十年中,越來越多的研究強調了內體運輸缺陷與神經變性之間的聯系。內溶酶體網絡是一個重要、復雜的細胞系統,專門負責蛋白質、脂質和其他代謝物的運輸,對細胞穩態至關重要。該通路的破壞與多種神經退行性疾病有關,包括阿爾茨海默病、帕金森病、肌側索硬化癥、亨廷頓病和額顳葉癡呆。此外,有強有力的證據表明該途徑的缺陷為診斷和治療干預創造了機會。在這篇評論文章中,我們簡要闡述了內溶酶體功能障礙在五種神經退行性疾病中的作用,并討論了未來的研究如何研究這種細胞內途徑,包括細胞外囊泡,特別關注外泌體,以鑒定新的疾病生物標志物。本文是“了解神經變性中的內溶酶體網絡"討論會議的一部分。


第5篇

Exosome subpopulations: the isolation and the functions in diseases


外泌體是細胞分泌的納米級細胞外囊泡。外泌體通過釋放其生物活性內容物(例如 DNA、RNA、脂質、蛋白質和代謝物)來介導細胞間通訊。外泌體的成分受外泌體產生細胞的調節。由于其來源不同,外泌體在大小、內容和功能上具有高度異質性。根據這些特征,外泌體可以分為具有不同功能的多個亞群。外泌體特定亞群的有效富集有助于研究其生物學功能。因此,已經開發了多種技術來分離外泌體的特定亞群。在本綜述中系統介紹了分離不同外泌體亞群的新興新技術,并總結了特定外泌體亞群在疾病,特別是腫瘤發生和進展中的關鍵作用。


第6篇

Ultrasensitive and high-resolution protein spatially decoding framework for tumor

extracellular vesicles


位于腫瘤來源的細胞外囊泡 (EV) 表面或管腔內的蛋白質在癌癥進展中發揮著作用。然而,由于現有蛋白質檢測方法的靈敏度有限和EV分離技術效率低下,EV內蛋白質定量受到了阻礙。在這項研究中,提出了 eSimoa 框架,這是一種創新方法,能夠以靈敏度和特異性對EV蛋白生物標志物進行空間解碼。使用此法,可以釋放并測量RAS或KRAS G12D 蛋白的絕對濃度,揭示它們在胰腺腫瘤來源的EV中的普遍性,實現了低豐度 EV 亞群的絕對蛋白質濃度定量檢測。 eSimoa 檢測 PBS 和血漿樣本中的EV,證實了它們在不同臨床樣本類型中的適用性。總體而言,eSimoa 框架提供了一個有價值的工具,可以 (1) 檢測血漿中濃度低至 105 EV /mL的EV,(2) 量化低至 fM 的絕對EV蛋白濃度,以及 (3) 解碼EV蛋白。這項研究強調了eSimoa在以最少的預純化方式識別臨床樣本中疾病特異性 EV 蛋白生物標志物方面的潛力,從而推動臨床轉化的進步。


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