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微流控毛細(xì)管電泳答疑小課堂

2024-1-25  閱讀(733)

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Revvity的明星產(chǎn)品LabChip GXII Touch 毛細(xì)管電泳系統(tǒng)采用一個(gè)單吸管微流體芯片,可快速對(duì)96或384孔板中的蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行指征分析。微流體芯片技術(shù)可全自動(dòng)的完成蛋白質(zhì)樣品的染色、脫色、電泳分離和分析。Labchip儀器的光學(xué)元件檢測(cè)到激光誘導(dǎo)的熒光信號(hào)后,易于操作的系統(tǒng)軟件自動(dòng)分析數(shù)據(jù),并通過Ladder和內(nèi)標(biāo)校正為用戶提供蛋白質(zhì)相對(duì)濃度、分子大小和純度等??闪⒓瓷商摂M膠圖、電泳峰圖或匯總表格式的電子數(shù)據(jù)結(jié)果以供用戶查閱或報(bào)告(如圖1)。




圖1. LabChip GXII Touch 軟件的圖形化用戶界面

常見問題

Q

Low marker的作用是什么?

A

用于校正、對(duì)齊。比如跑400個(gè)樣品,出峰時(shí)間會(huì)有差異,必須用Low marker校正。

Q

為什么有的樣品比Ladder跑得慢?

A

因?yàn)樵噭┲械腖adder是沒有經(jīng)過任何糖基化等修飾的,若樣品是經(jīng)過修飾的,分子量就偏大,會(huì)跑得稍慢,基于原理,這一點(diǎn)在任何CE技術(shù)中都一樣,無法避免。


Q

蛋白芯片與核酸芯片有什么不同?

A

蛋白芯片有脫色步驟,因?yàn)榈鞍鬃冃院?,樣品中有大量的SDS,需要去掉沒有與蛋白結(jié)合的SDS,否則背景值會(huì)很高。另外蛋白芯片不需要wash,而核酸芯片需要wash,因?yàn)榈鞍仔酒褂幂^快,能檢測(cè)的樣本只有400/200,經(jīng)過測(cè)試發(fā)現(xiàn)不wash,對(duì)性能沒有影響。(此處Wash指實(shí)驗(yàn)結(jié)束后芯片加Storage Buffer后放在設(shè)備上wash。)


Q

機(jī)器Purge的功能有什么作用?

A

Purge是施加3 min的正壓來疏通管路,防止冷凝水等堵塞管路。


Q

機(jī)器是否需要每天關(guān)機(jī)?

A

若做不到每天關(guān)機(jī),至少需要2-3天重啟一下機(jī)器。


Q

上一個(gè)樣品run完到下一個(gè)樣品會(huì)有一個(gè)wash的過程,這一步是否能夠wash干凈?

A

可以一針樣品一針?biāo)y(cè)試,實(shí)際測(cè)試結(jié)果是上一個(gè)樣品不會(huì)對(duì)下一個(gè)樣品產(chǎn)生干擾。


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