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常見細胞因子及其檢測方法

2023-12-8  閱讀(325)

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細胞因子是由免疫細胞(如單核、巨噬細胞、T細胞、B細胞、NK細胞等)和某些非免疫細胞(內皮細胞、表皮細胞、纖維母細胞等)經刺激而合成、分泌的一類具有廣泛生物學活性的小分子蛋白質。其作用是通過結合相應受體調節細胞生長、分化和效應,調控免疫應答。細胞因子,是細胞分化和行使功能時的產物,相當于人體內各類細胞間相互交流的“信使"。它們被廣泛地應用于醫學診斷、抗癌治療、免疫調節、以及自身免疫等多種領域。





一、常見細胞因子

細胞因子可分為白細胞介素(interleukin, IL)、干擾素 (interferon, IFN)、腫 瘤 壞 死 因 子 (tumornecrosisfactor,TNF)、集落刺激因子(colony stimulating factor, CSF)、生長因子、趨化性細胞因子等。眾多的細胞因子在體內通過旁分泌、自分泌或內分泌等方式發揮作用,同時具有多效性、重疊性、拮抗性、協同性等多種生理特性,從而形成較復雜的細胞因子調節網絡,參與人體多種重要的生理功能。





二、常見細胞因子檢測方法


1、ELISA測定

酶聯免疫吸附測定(ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體特異性結合進行免疫反應的定性和定量檢測方法。

特點:穩定性好、提高檢出率、分子量大,操作簡單、快速、敏感性高、特異性強、實驗設備要求簡單、應用范圍廣泛、無放射性污染、能定性及半微量、微量、超微量定量分析,是目前應用廣,發展最快的酶免疫學技術方法。

2、CBA測定

Cytometric Bead Array(CBA)是指細胞因子微球檢測技術。即微量樣本多指標流式蛋白定量技術是一個基于流式細胞檢測系統的多重蛋白定量檢測方法,它能夠同時對單個樣品中的多個指標進行檢測。是一種基于流式細胞檢測系統的多重蛋白定量檢測方法,它能夠同時對單個樣品中的多個指標進行檢測。

特點:樣本用量少,多指標檢測;操作方便,節省時間;同一樣本同時檢測,誤差小,精密度高;標準曲線自動測定,專用軟件自動計算,檢測范圍寬,靈敏度高;無酶-底物背景干擾。

3、FCM測定

流式細胞術是一種生物學技術,用于對懸浮于流體中的微小顆粒進行計數和分選。這種技術可以用來對流過光學或電子檢測器的一個個細胞進行連續的多種參數分析。流式細胞術(Flow CytoMetry,FCM)是對懸液中的單細胞或其他生物粒子,通過檢測標記的熒光信號,實現高速、逐一的細胞定量分析和分選的技術。

特點:可以檢測依托流式平臺檢測同時檢測多指標。

4、RT-PCR測定

細胞因子的mRNA壽命短且拷貝數低,因此難以在小量樣本中進行檢測。RT-PCR是一種能檢測細胞內低豐度特異RNA的方法,其原理是首先以RNA為模板,在逆轉錄酶的催化下,合成與RNA互補的cDNA。然后以cDNA為模板,用PCR技術對靶序列進行擴增,使微量細胞因子的RNA經放大后檢出。RT-PCR能檢出單個細胞中少于10個拷貝的特異RNA,如同時放大內參照物(如β-Actin),即可對RT-PCR檢出的細胞因子mRNA進行定量。


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