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操作技巧 | 如何降低內毒素檢測失敗率?

2023-12-4  閱讀(196)

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在日常的內毒素檢測中,我們經常會遇到結果異常或失敗, 常見為空白孔反應、標準曲線失敗和CV%值超標

今天我們來聊聊,針對以上這些,在日常的內毒素檢測中,該怎么應對?

1. 空白孔和陰性對照的失敗

空白孔反應是分析方法失敗常見原因之一

  • 移液過程中,避免灰塵、毛發、皮膚細胞和其他顆粒物對反應孔造成污染

  • 樣品準備時,移液吸頭不應經過空白孔或陰性對照孔

  • 制備標準品時,確保充分混勻,保證濃度點和空白點有濃度差

  • 切勿使用可能被污染的LAL試劑水制備空白孔

  • 通過使用可靠廠商的試劑耗材,進一步降低污染的可能性


2. 標準曲線和陽性對照的失敗

這類實驗的失敗通常是與實驗人員和移液過程相關



  • 標準品制備過程中正確使用已校準的移液器和匹配的吸頭

  • 實驗人員需專注于標準品、樣品制備和96孔板制備過程(*非常重要)

  • 添加鱟試劑時推薦使用多通道移液器降低方法變異性


3. “熱孔"或單孔污染

在空白、陰性對照或內毒素含量較低的樣品孔中,常常可能發生熱孔或單孔污染。通常表現為復孔中一個較另一個相比,有明顯的高內毒素信號。“熱孔"確切原因尚不清楚,如果確認多次的重新測試是由于96孔板的原因,建議更換新批次的96孔板

以上所提到的情況中,大多數與人工操作有關,Lonza的PyroTecTM PRO 系統是一個靈活、強大和用戶友好的自動化細菌內毒素檢測系統,能有效減少人工手動過程中的移液和加樣錯誤,大大降低實驗人員操作時間、提高實驗效率



此外,PyroTecTM PRO系統樣品配置高度靈活、實驗準備時間短(<10min/42樣品)、操作便利等特點




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