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內毒素檢測(凝膠法)的原理及詳細步驟!

2023-11-13  閱讀(647)

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一,內毒素檢測(凝膠法)的原理

酶原 內毒素 凝固酶

凝固原 凝固酶 凝固素

革蘭氏陰性細菌內毒素催化了LAL中酶原的活化。初始活化速率由內毒素的濃度決定。活化后的酶(凝固酶)水解了也存在于LAL中的凝血蛋白(凝固原)內的特定化合鍵。水解后,產生的凝固素自行聯合,并形成凝膠狀膠塊。

凝膠法是一種用于革蘭氏陰性細菌內毒素的測試。凝膠法在37℃的水浴或干燥熱塊中放置的試管中操作。孵育一小時后,將試管翻轉180°。凝塊牢固地附著在試管底部,表明是陽性反應。如果液體從試管側面向下流動,則結果是內毒素陰性。



二,檢測所需主要設備及材料

試劑

– 鱟試劑(LAL)(PYROGENT™ 試劑)

– 內毒素工作標準品(CSE)

– LAL 試劑檢查用水(LRW)(# W50-640, W50-100, W50-500)

器具

– 玻璃稀釋管,13 × 100 mm(# N207)

– 玻璃反應管,10 × 75 mm(# N201, N205)

– 獨立包裝的血清吸管(選購)

– 標簽

請使用經內毒素試驗驗證合格的無熱原器具。

設備

– 加熱塊或非循環熱水浴

– 移液器

– 計時器

– 漩渦混合器

– 試管架

三,操作步驟

本指南分步描述了如何進行傳統凝膠法 鱟試劑(以下簡稱LAL)試驗。試驗開始前,先使試劑瓶溫度與室溫相同。



四,注意事項

– 使用配套的LAL和CSE 試劑

– 建議勿使用塑膠管稀釋內毒素

– 遵循所有關于內毒素漩渦震蕩次數的建議

– 使用經內毒素試驗驗證合格的無熱原器具

– 使用前,先使試劑溫度與室溫保持相同

– 不要對LAL進行漩渦震蕩

– 不要污染樣品、標準品、LRW 和器具

– 應正確安裝、驗證并維護設備儀器,避免影響凝膠形成

五,瑋馳相關產品


凝膠法LAL試劑盒



品牌貨號名稱規格靈敏度(EU/ml)
LonzaN283-06PYROGENT™+凝膠法LAL試劑盒(有內毒素)64次測試0.06
LonzaN283-125PYROGENT™+凝膠法LAL試劑盒(有內毒素)64次測試0.125
LonzaN294-03PYROGENT™+凝膠法LAL試劑盒(有內毒素)200次測試0.03
LonzaN294-06PYROGENT™+凝膠法LAL試劑盒(有內毒素)200次測試0.06
LonzaN294-125PYROGENT™+凝膠法LAL試劑盒(有內毒素)200次測試0.125
LAL試劑檢查用水


品牌貨號名稱規格
LonzaW50-640LAL試劑檢查用水<0.005 EU/mL,30 ml/瓶
LonzaW50-100LAL試劑檢查用水<0.005 EU/mL,100 ml/瓶
LonzaW50-500LAL試劑檢查用水<0.005 EU/mL,500 ml/瓶
LonzaW50-1000LAL試劑檢查用水<0.005 EU/mL,1000 ml/瓶


無熱原試管


品牌貨號名稱規格
LonzaN207無熱原試管30/鋁箔包
LonzaN201無熱原試管50/箱
LonzaN205無熱原試管50/鋁箔包
吸頭


品牌貨號名稱規格
LonzaBE25-415Eppendorf® 2-200μl Biopur™ 移液管吸頭<0.001 EU/mL,5個托盤/pkg;96個吸頭/托盤
LonzaBE25-417Eppendorf® 50-1000μl Biopur™ 移液管吸頭<0.001 EU/mL,5個托盤/pkg;96個吸頭/托盤


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