詳細(xì)介紹
化學(xué)結(jié)構(gòu):
Alexa Fluor 488 蛋白標(biāo)記試劑盒是一種用于將熒光染料Alexa Fluor 488與蛋白質(zhì)共價(jià)結(jié)合的試劑盒。該試劑盒適用于標(biāo)記分子量在12至150 kDa之間的蛋白質(zhì),特別適合免疫球蛋白抗體。
染料特性:Alexa Fluor 488染料含有四氟苯基(TFP)酯基團(tuán),比常用的琥珀酰亞胺(NHS)酯更穩(wěn)定。TFP酯能與蛋白質(zhì)的伯胺反應(yīng),形成穩(wěn)定的染料-蛋白共軛物。
熒光特性:Alexa Fluor 488的熒光激發(fā)和發(fā)射值分別為494 nm和519 nm,熒光強(qiáng)度在pH 4至10之間不受影響。
細(xì)胞成像:用于標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、多肽等生物分子,觀察其分布和動(dòng)態(tài)變化。
流式細(xì)胞術(shù):用于標(biāo)記細(xì)胞表面的受體、抗原等,進(jìn)行細(xì)胞分類和計(jì)數(shù)。
免疫組化:用于標(biāo)記組織樣本中的特定蛋白質(zhì),進(jìn)行定位和定量分析。
結(jié)構(gòu)式:
基礎(chǔ)知識(shí)概述:
英文名:Alexa Fluor 488 蛋白標(biāo)記試劑盒,AF488 蛋白標(biāo)記試劑盒
規(guī)格標(biāo)準(zhǔn):1mg、5mg、10mg
試劑廠家:陜西新研博美生物科技有限公司
試劑盒組成:
Component A:Alexa Fluor 488 TFP ester,3瓶。
Component B:84 mg。
Component C:反應(yīng)管,3個(gè)。
Component D:離心過濾器(Nanosep MF 0.2μm),3個(gè)。
Component E:純化樹脂(Bio-Gel P-6 fine resin),約3 mL。
蛋白質(zhì)準(zhǔn)備:
濃度要求:蛋白質(zhì)濃度應(yīng)為1 mg/mL,且緩沖液中不含伯胺,這些物質(zhì)會(huì)抑制標(biāo)記反應(yīng)。
純度要求:部分純化的蛋白質(zhì)樣本或含有載體(如牛血清白蛋白)的蛋白質(zhì)樣本標(biāo)記效果不佳。
脫鹽處理:在標(biāo)記前,可使用透析或小規(guī)模凝膠過濾去除蛋白質(zhì)樣本中的低分子量成分。
標(biāo)記反應(yīng):
染料與蛋白質(zhì)摩爾比(MR):根據(jù)蛋白質(zhì)的分子量,推薦的染料與蛋白質(zhì)摩爾比為1:10至1:50,以實(shí)現(xiàn)最佳標(biāo)記效果。
反應(yīng)步驟:
將蛋白質(zhì)溶液與Component A(染料)和Component B混合。
在室溫下反應(yīng)30分鐘。
使用Component D(離心過濾器)純化標(biāo)記后的蛋白質(zhì),去除未反應(yīng)的染料。
注意事項(xiàng):
純度標(biāo)準(zhǔn)95%+
保存建議:避免反復(fù)凍融,避光保存,儲(chǔ)液應(yīng)該立即使用,任何未用的溶液分裝小份冷凍于 < -20°C
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究
相關(guān)試劑(部分):
Ald-Ph-PEG12-TFP ester
Bis-PEG4-TFP ester
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Mal-PEG4-Glu(TFP ester)-NH-m-PEG24
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Mal-amido-PEG4-TFP ester
Sulfo DBCO-TFP Ester
Alexa Fluor 488 蛋白標(biāo)記試劑盒