詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:
方法簡介
實驗室分離的兔子宮內膜基質采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔子宮內膜基質經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 兔子宮內膜基質原代細胞 | 組織來源 | 子宮 |
英文名稱 | Rabbit Endometrial Stromal Cells | 貨號 | YS-01X8487 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介:
兔子宮內膜基質細胞分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結構維持,這些結構受損或松弛時,可以引起子宮脫垂。子宮內膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,有分泌細胞和纖毛細胞二種)和固有膜(由結締組織構成,其內有大量的星形細胞,稱為基質細胞)組成,子宮內膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,功能層較厚,約占內膜厚度的4/5;基底層較薄較致密,約占1/5,功能層可剝脫,而基底層不可剝脫。子宮內膜上皮細胞主要功能:①子宮內膜亦稱子宮黏膜,是指構成哺乳類子宮內壁的一層;②子宮內膜對動情素和孕激素都起反應,因此可隨著性周期(發情周期、月經周期)發生顯著的變化。子宮內膜與胚胎附植密切相關,在生殖生理的研究中占重要地位。在胚胎與母體“對話"的過程中,子宮內膜上皮細胞充當了極其重要的角色。子宮內膜構成雌性哺乳動物子宮壁的內層,位于子宮腔面,在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內膜的再生修復是子宮的重要生理功能。體外培養的子宮內膜上皮細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔子宮內膜基質細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品:
豚鼠肺細胞;GP-F1 | 擬南芥IKI3抗體 |
母細胞瘤蛋白PHOX2B抗體 | 鈣平衡調節蛋白1抗體 |
細絲蛋白2抗體 | 巨噬細胞炎癥因子1β 抗體 MIP-1β |
酸化巨噬細胞集落刺激因子受體抗體 | 單克隆抗體 |
1號染色體開放閱讀框87抗體 | 同源盒蛋白HOXC9抗體 |
人滑膜細胞(HS)( 5×105 ) | 人結膜纖維原細胞(HConF)(5×105 ) HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞 Human |
人導管癌細胞;ZR-75-30 | ENPEP Others Rat 大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A (aa 41-945) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
A172(人腦膠質瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H107人軟骨細胞培養基100mL 人胚腎二倍體細胞;CCC-HEK-1 | HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
CFPAC-1(人胰腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0102Hep 3B(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠腹水瘤細胞;S-180 | PBK Others Human 人 PDK / PDZ binding kinase / TOPK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-R031大鼠腸動脈內皮細胞培養基100mL | 兔子宮內膜基質原代細胞巨噬細胞炎癥因子1β 抗體 MIP-1β |
HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/35820/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | 正常大鼠腎細胞;NRK |
人癌細胞;MDA-MB-157 | PDCD1LG2 Others Human 人 PD-L2 / B7-DC / CD273 人細胞裂解液 (陽性對照) |
白牦牛皮膚細胞;Yak-2 橫紋肌瘤細胞,A673細胞 NAMALWA(Butt's 淋巴瘤細胞) | N-鈣粘附分子抗體 |
宮頸癌原癌基因2抗體 | 人表皮角質細胞-新生兒(HEK-n)( 5×105 ) |
BCL2樣12含蛋白抗體 | 鼻咽癌細胞相關基因6抗體 |
丙型肝炎病毒-NS3反轉錄激活蛋白2抗體 | 人滑膜細胞(HS)( 5×105 ) |
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。