詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:
方法簡介
實驗室分離的兔支氣管上皮采用蛋白酶-蛋白酶混合消化法結合機械刮刷并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔支氣管上皮經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 兔支氣管上皮原代細胞 | 組織來源 | 支氣管 |
英文名稱 | Rabbit Bronchial Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7991 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介:
兔支氣管上皮細胞分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由氣管分出的各級分枝,由氣管分出的一級支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細長,走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區別就是,氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架,而支氣管不是。支氣管上皮是氣道與外界環境接觸的第一道防線,不僅是各種病原體、炎癥介質作用的靶細胞,還作為效應細胞合成、釋放多種炎性介質和細胞因子,從而參與氣道炎癥及免疫反應。支氣管上皮細胞在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺癌、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道疾病的發病機制中均起著重要的作用。體外培養的原代支氣管上皮細胞因與體內組織在形態結構和功能活動上存在很大的相似性,因此,在基礎及臨床研究中極為重要。
培養信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:上皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔支氣管上皮細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品:
豚鼠皮膚細胞;GP-S3 | 胰島素樣生長因子結合蛋白2抗體 |
蛋白質酸酶2A-B55抗體 | 鈣依賴分泌激活蛋白1抗體 |
甲精結合蛋白3抗體 | 髓鞘少樹突膠質細胞糖蛋白抗體 |
衰變加速因子CD55抗體 | 多能發育相關基因4抗體 |
20號染色體開放閱讀框151抗體 | 單甲基組蛋白H3K9抗體 |
EPD1 Others Mouse 小鼠 CD39 / EPD1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | F3 Others Mouse 小鼠 F3 / Tissue factor / CD142 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人低侵襲性脈絡膜黑色素素瘤細胞;OCM-1A | ERBB2 Others Human 人 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
786-O(人腎透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H091人大隱靜脈內皮細胞培養基100mL 人臍動脈內皮細胞RNAHUAEC miRNA5 μg | ESM1 Others Human 人 ESM1 / Endocan 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
HDLEC-c 人類皮膚淋巴管內皮細胞(HDLEC)來自少年者 500,000cells 骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | HUF Pellet 人子宮成纖維細胞團塊 > 1 mio.cells 人淋巴內皮細胞裂解物HLECL |
CM-R047大鼠腸微血管細胞培養基100mL | 兔支氣管上皮原代細胞髓鞘少樹突膠質細胞糖蛋白抗體 |
HCASMC-c 人冠狀動脈平滑肌細胞(HCASMC) 500,000cells 小腸隱窩上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | 兔脂肪間質干細胞 Rabbit adipose derived mesenchymal stem cells |
RN-s, 大鼠紋狀體元 Rattus | 水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S4 胃腺癌細胞,SGC7901細胞 CW-2(結腸腺癌細胞) |
IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細胞裂解液 (陽性對照) | P450 19抗體 |
上游結合蛋白1抗體 | ECE2 Others Human 人 ECE-2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
腦特異性血管生成抑制蛋白2抗體 | 肌痙攣性癲癇病相關EPM2蛋白抗體 |
G蛋白偶聯受體激酶6抗體 | EPD1 Others Mouse 小鼠 CD39 / EPD1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。