詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:
方法簡介
實驗室分離的兔三叉元采用消化法結合元專用培養基培養、化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔三叉元經β-Tubulin-Ⅲ免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 兔三叉神經元原代細胞 | 組織來源 | 三叉神經 |
英文名稱 | Rabbit Trigeminal Neuron Cells | 貨號 | YS-01X8422 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介:
兔三叉元細胞分離自三叉組織;三叉為粗大的混合性腦,含一般軀體感覺和特殊內臟運動兩種纖維。其特殊內臟運動纖維起于腦橋中段的三叉運動核,纖維組成三叉運動根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處出腦,位于感覺根下內側,后進入三叉第3支下頜中,經卵圓孔出顱,隨下頜分支分布于咀嚼肌等。運動根內還含有三叉中腦核有關的纖維,主要傳導咀嚼肌的本體感覺。三叉內以軀體感覺纖維為主,這些纖維的細胞體位于三叉節(半月節)內,該節位于顱中窩顴骨巖部的前面三叉壓跡處,為硬腦膜形成的美克爾腔包裹。三叉節由假單極元組成,其中樞突集中構成了粗大的三叉感覺根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處入腦,止于三叉諸感覺核,其中傳導痛溫覺的纖維主要終止于三叉脊束核;傳導觸覺的纖維主要終止于三叉腦橋核。三叉節細胞的周圍突組成三叉三大分支,即第1支眼、第2支上頜、第3支為下頜。從3大分支不斷分支分布于面部皮膚、眼及眶內、口腔、鼻腔、鼻旁竇的粘膜、牙、腦膜等,傳導痛、溫、觸等多種感覺。
培養信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養基:含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:元細胞樣
傳代特性:屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔三叉元細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產品:
小鼠垂體瘤細胞;GT1-1 | 組織激活過氧化酶活化增生受體γ蛋白抗體 |
G蛋白γ13/Gγ13 抗體 | 酸化自噬相關蛋白4A抗體 |
肌側索硬化蛋白2抗體 | Fas活化激酶結構域蛋白2抗體 |
腺苷酸環化酶10抗體 | 組織激活過氧化酶活化增生受體γ蛋白抗體 |
Fas活化激酶結構域蛋白2抗體 | 酸化自噬相關蛋白4A抗體 |
人表皮微血管內皮細胞(HDMEC)( 5×105 ) | HBL-100(人整合SV40基因的上皮細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0361HPAC(人胰腺腺泡上皮癌)5×106cells/瓶×2 水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S2 |
人肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H292 | 人表皮角質細胞-(HEK-a) ( 5×105 ) |
RM-1(小鼠前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人 VIPR2 / VPAC2 人細胞裂解液 (陽性對照) | CD302 Others Mouse 小鼠 CD302 / CLEC13A 人細胞裂解液 (陽性對照) |
TE-13(人食管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 心肌成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | CCD-1095Sk細胞,人浸潤性導管癌旁皮膚細胞 鼠肝癌細胞,H22-H8D8細胞 腦成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
EB病毒轉化的人B淋巴細胞(彝族);KM934 | 兔三叉神經元原代細胞Fas活化激酶結構域蛋白2抗體 |
HEC-1-B細胞,子宮內膜腺癌細胞 人鼻咽癌細胞(高分化),CNE1細胞 CL-0257BC-009(人癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 人口腔角質細胞RNAHOK miRNA5 μg |
皮膚癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml | ADA Others Human 人 ADA / Adenosine deaminase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
FETUB Others Mouse 小鼠 FETUB / Fetuin-B 人細胞裂解液 (陽性對照) | 鐵蛋白輕鏈抗體 |
腺苷酸環化酶10抗體 | 人APP-PS1(C410Y)雙基因轉染細胞株;7WCY1.0 食管癌細胞,TE-1細胞 PK-15細胞,豬腎細胞系 |
G蛋白γ13/Gγ13 抗體 | 肌側索硬化蛋白2抗體 |
鐵蛋白輕鏈抗體 | 人表皮微血管內皮細胞(HDMEC)( 5×105 ) |