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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的雞骨骼肌采用混合膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的雞骨骼肌經α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 雞骨骼肌原代細胞 | 組織來源 | 骨骼肌組織 |
英文名稱 | Chicken Skeletal Muscle Cells | 貨號 | YS-01X7049 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
雞骨骼肌細胞分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態、結構和功能的器官，有豐富的血管、淋巴分布，在軀體支配下收縮或舒張，進行隨意運動。肌肉可根據共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方。肌細胞內有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）。明帶染色較淺，而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間，有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區段，叫做一個肌節。骨骼肌細胞也稱橫紋肌細胞，細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方，細胞多呈梭行，具有一定的方向性。骨骼肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。
培養信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
HCC-9204細胞，肝癌細胞 人細胞,HeLa細胞 人角膜上皮細胞cDNAHCEpiC cDNA | beta-Amyloid 1-42 (CT)： β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體 0.1ml |
Anti-phospho-HDAC7 (Ser318) 0酸化組蛋白去乙酰化酶7抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml | Rhesus antibody Rh ACADS ?；摎涿付替溈贵w 規格 0.2ml |
Anti-Caspase-3/RBITC 紅色熒光素羅丹明標記(RBITC)Caspase-3 蛋白抗體(標記抗體)Multi-class antibodies規格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IFN-β 干擾素β抗體 規格 0.1ml |
NGF-R(p75NTR) 生長因子受體(抗原) 0.5mg | HIV2 gp36： 人類免疫缺陷病毒2型/2型艾滋病病毒gp36抗體 0.1ml |
IgM/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗馬IgM 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM50B FAM50B蛋白抗體 規格 0.2ml |
非洲綠猴腎細胞;BS-C-1 | CM-H018人成纖維細胞培養基100mL |
HT-29細胞，人結腸腺癌細胞 人黑色素瘤細胞,HME7細胞 SV40T轉化人臍靜脈內皮細胞;PUMC-HUVEC-T1 | H4-IIE(大鼠肝癌細胞 ) 5×106cells/瓶×2 |
CL-0181P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2 | Acc-2(人涎腺腺樣囊性癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
成骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | IL22 Protein Human 重組人 IL22 / IL-22 / Ierleukin 22 蛋白 |
HR-8348細胞，直腸腺癌 人淋巴細胞瘤細胞,JK(Jurkat)細胞 人小細胞肺癌;NCI-H2227 | 雞骨骼肌原代細胞Rhesus antibody Rh IFN-β 干擾素β抗體 規格 0.1ml |
HGF Protein Rat 重組大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 | CSF2 Others Mouse 小鼠 GM-CSF / CSF2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
35.1雜交瘤細胞抗CD2 35.1 hybridoma cells against CD2 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | 蛋白酶-EDTA(含100mL酶解緩沖液) 10mL |
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;Mao | Rhesus antibody Rh IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗水貂IgG 規格 0.1ml |
NOS ELISA Kit 大鼠合成酶 96T | FO 小鼠骨髓瘤細胞 |
rDen-2(rh-Dengue Virus) 重組人登革熱病毒2型診斷抗原Multi-class antibodies規格： 100ug | aGT(Human angiotensinogen) ELISA Kit 人血管緊張素原Multi-class antibodies規格： 48T |
MDMX： MDM2樣P53蛋白結合抗體 0.1ml | 非洲綠猴腎細胞;BS-C-1 |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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