詳細(xì)介紹
人原代海綿體平滑肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基
人原代海綿體平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人原代海綿體平滑肌細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含人原代海綿體平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人原代海綿體平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇人原代海綿體平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查人原代海綿體平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果人原代海綿體平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗人原代海綿體平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若人原代海綿體平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待人原代海綿體平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用人原代海綿體平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本人原代海綿體平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響人原代海綿體平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
乙酰基轉(zhuǎn)移酶EID1抗體 | 環(huán)指蛋白213 |
細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白5抗體 | 程序性細(xì)胞死亡2抗體 |
周期素H抗體 | 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞裂解物HOPCL |
ASMTL蛋白抗體 | 精酶1抗體 |
酸化IKB α抗體 | DNA聚合酶κ/DNA pol κ抗體 |
ITGAX & ITGB2 Others Human 人 ITGAX & ITGB2 Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
γ-銜接蛋白相關(guān)蛋白2抗體 | CL-0138Lec1(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
相似腫瘤抑制基因HUGL抗體 | 人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4 |
鹽多谷合成酶抗體 | NGFR Others Human 人 NGFR / P75 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白172抗體 | 人腦血管周細(xì)胞 (HBVP) ( 5×105 ) |
晚期包膜蛋白1抗體 | 人臍帶動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 (HUAEC)( 5×105 ) |
H22細(xì)胞,小鼠肝癌細(xì)胞 Neuro-2A(腦瘤細(xì)胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0909 | 人原代海綿體平滑肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基小鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
PC-12(未分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分化) | HAoSMC Pellet 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人無(wú)色素睫狀上皮細(xì)胞裂解物HNPCEpiCL |
WI-38(人胚肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠癌細(xì)胞;CCC-Ca761-03 | IL8 Others Human 人 IL-8 (aa 1-77) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |