詳細(xì)介紹
人原代乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
人原代乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人原代乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含人原代乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人原代乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇人原代乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查人原代乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果人原代乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗人原代乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若人原代乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待人原代乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用人原代乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本人原代乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響人原代乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
內(nèi)臟異位相關(guān)蛋白/鋅指蛋白203抗體 | 熱休克蛋白27抗體 |
腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27/38抗體 | 中期因子/肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子抗體 |
瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白7抗體(M亞家族) | CCC-HPE-2細(xì)胞,人胚胎胰腺組織來(lái)源細(xì)胞 人舌癌細(xì)胞系,Tca8113-P160細(xì)胞 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3 |
脂肪酸結(jié)合蛋白5抗體(上皮細(xì)胞型) | 生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43 |
半乳糖凝集素10抗體 | 軟骨基質(zhì)相關(guān)蛋白UCMA抗體 |
SF126(人腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | DPP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
α-中連蛋白抗體 | Hep 3B2.1-7[Hep 3B;Hep-3B;Hep3B]細(xì)胞,人肝癌細(xì)胞 人胚腎細(xì)胞(亞系克隆),FIP293細(xì)胞 胎兒表皮角化細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
泛素蛋白連接酶D1抗體 | SRC Others Mouse 小鼠 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
半乳糖轉(zhuǎn)移酶7亞基β1,4抗體 | VSTM1 Protein Human 重組人 VSTM1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
共濟(jì)失調(diào)蛋白2結(jié)合蛋白1抗體 | 小鼠垂體瘤細(xì)胞(分泌促生長(zhǎng)激素分泌激素);AtT-20 |
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白82抗體 | TNFSF10 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TNFSF10 / AIL / APO-2L 蛋白 |
人胚胎眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;HFTF | 人原代乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基ICOSLG Others Mouse 小鼠 B7-H2 / CD275 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
大鼠腦膜細(xì)胞(RMC)(5×105) | 青/溶液P/S |
水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7) | CM-M119小鼠晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |