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技術文章

原代細胞培養中的支原體污染的預防及處理

閱讀:974          發布時間:2018-6-19

原代細胞培養(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。國內外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精氨酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和菜氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。國外調查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。

    支原體污染的來源包括工作環境的污染、操作者本身的污染(某些支原體在人體是正常菌群)、培養基的污染、被污染細胞造成的交叉污染、實驗器材的污染、制備細胞的原始組織或器官的污染,等等。

       組織細胞培養工作中,可以從以下幾方面來預防支原體的污染:控制環境污染;嚴格實驗操作;細胞培養基和器材要保證無菌;在細胞培養基沖加入適量的抗生素(antibiotic)。

     抗生素(antibiotic)主要用于消毒培養液,是培養過程中預防微生物污染的重要手段,也是微生物污染不嚴重時的“急救”方法。不同抗生素(antibiotic)殺滅微生物不同,應根據需要選擇。

    在細胞培養過程中如果發現破碎的細胞甚多,培養細胞需要頻繁改善營養環境才能支持長期傳代培養時,應該懷疑支原體污染。支原體污染難以觀察特殊的外觀變化,培養液也不渾濁。

     支原體污染原代細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有:抗生素(antibiotic)處理、抗血清處理、抗生素(antibiotic)加抗血清和補體聯合處理。要注意的是:支原體沒有細胞壁(cell wall),故作用于細胞壁(cell wall)生物合成的抗生素(antibiotic),如內酰胺類、萬古霉素等是不敏感的;對多粘菌素、利福平、磺胺藥物普遍耐火*。對支原體zui有抑制活性抗生素(antibiotic)是四環素類、大環內酯類等,氨基糖苷類、氯霉素對支原體有較小的抑制作用。必要時更換所有培養用物。通常,濾過除菌的方法對支原體是沒有作用的。

 MDM2 磷酸化肝細胞生長因子受體(原癌基因)抗體

 MDR1/p-GP/CD243 (C-terminus) 磷酸化肝細胞生長因子受體(原癌基因)抗體

 MDR1/p-GP/CD243 (N-terminus) 磷酸化肝細胞核因子4α抗體

 ME1 磷酸化干擾素調節因子7抗體

 Measles virus fusion protein 磷酸化干擾素調節因子3

 MeCP2 磷酸化鈣介質素抗體

 MEF2A 磷酸化鈣調節蛋白-1抗體

 Megsin 磷酸化鈣/鈣調素依賴蛋白激酶CAMK2G抗體

 MEK1/2(MAPKK1) 磷酸化鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗體
原代細胞

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