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基于已知對(duì)泛素具有親和力的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域,串聯(lián)泛素結(jié)合實(shí)體(Tandem Ubiquitin Binding Entities,TUBEs)已被開發(fā)用于分離和鑒定泛素化蛋白。TUBEs對(duì)多泛素化結(jié)構(gòu)的親和力比單個(gè)泛素結(jié)合相關(guān)結(jié)構(gòu)域(UBA)高出多達(dá)1000倍。此外,TUBEs對(duì)多泛素化蛋白具有保護(hù)作用,使其即使在相對(duì)低豐度的情況下也能被檢測(cè)到。這些特性有效地“捕獲"了處于多泛素化狀態(tài)的蛋白質(zhì)。
在溶液相中,TUBE 2對(duì)K63連接的四聚泛素的親和力大約等于對(duì)K48連接的四聚泛素的親和力(5-10 nM)。TUBE 2通過HIS6-SUMO標(biāo)簽高效偶聯(lián)到瓊脂糖上,避免了對(duì)UBA結(jié)構(gòu)域的修飾。
艾美捷泛素串聯(lián)結(jié)合實(shí)體2,瓊脂糖偶聯(lián):
貨號(hào):UM-0402-1000
親和標(biāo)簽:HIS6-SUMO
純度:(偶聯(lián)前)通過SDS-PAGE分析,純度>95%
分子量:不適用
物理狀態(tài):50%樹脂懸浮液(PBS,pH 7.5,20%乙醇)
數(shù)量:0.5 mL樹脂
溶解性:不適用
儲(chǔ)存:-20°C。避免在更低溫度下儲(chǔ)存。
應(yīng)用:
從細(xì)胞系、組織和器官中捕獲多泛素化蛋白
保護(hù)多泛素化蛋白免受去泛素化和蛋白酶體降解
泛素串聯(lián)結(jié)合實(shí)體2,瓊脂糖偶聯(lián)圖片:
文獻(xiàn)參考:
1. Stormo, Adrienne ED, Farbod Shavarebi, Molly FitzGibbon, Elizabeth M. Earley, Hannah Ahrendt,Lotus S. Lum, Erik Verschueren et al 2022) "The E3 ligase TRIM1 ubiquitinates LRRK2 and controls its localization, degradation, and toxicity." Journal of Cell Biology 221, no. 4.
2. Hark, Timothy J., Nalini R. Rao, Charlotte Castillon, Tamara Basta, Samuel Smukowski, Huan Bao,Arun Upadhyay et al. (2021) "Pulse-chase proteomics of the App knockin mouse models of
Alzheimer’s disease reveals that synaptic dysfunction originates in presynaptic terminals." Cell
systems 12, no. 2: 141-158.
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