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在生命活動中，機體持續產生自由基。適量的自由基參與生理過程，然而過量自由基會引發氧化應激，損害細胞和組織，與衰老、癌癥等多種疾病密切相關。因此，抗氧化能力的評估成為生命科學、食品科學等領域的重要研究內容。目前，常用的抗氧化能力評估方法眾多，其中三大測定方法——DPPH自由基清除法、ABTS自由基陽離子清除法和FRAP法（鐵離子還原能力測定法），因其操作相對簡便、結果可靠等優勢，得到了廣泛應用。

1. 以氧化還原潛力評價的抗氧化能力

FRAP法：

在酸性環境下，抗氧化物質能夠將Fe3+-三吡啶三嗪（Fe3+-TPTZ）還原，生成藍色的Fe2+-TPTZ。通過在593nm波長處檢測吸光度的變化，并以標準抗氧化劑Trolox作為對照體系，從而量化抗氧化物質的抗氧化能力。

優點：由于該反應在酸性條件下進行，可以有效抑制內源性干擾因素，確保測定結果的準確性

缺點：由于含有巰基（-SH）的有機物質無法與三價鐵離子發生反應，因此該方法無法測定硫醇化合物的還原能力。

適用樣本：該方法適用范圍廣泛，適用于生物體液、食品、植物提取液、果汁等多種物質的總抗氧化能力檢測。

2. 以清除自由基能力評價的抗氧化能力

ABTS法

ABTS與氧化劑反應生成評價體系的基礎——穩定的藍綠色陽離子自由基ABTS+，該自由基能溶于水相或酸性乙醇介質中，并在734nm處呈現最大吸收峰。當被測物質加入ABTS+溶液后，其含有的抗氧化成分會與ABTS+發生反應，導致反應體系褪色。ABTS+的還原程度及反應時間取決于生物活性物質的抗氧化能力和濃度。通過在734nm處檢測吸光度的變化，并以Trolox作為對照體系，可量化抗氧化物質的抗氧化能力。

優點：ABTS法具有快速、簡便、特異性高、與抗氧化劑的生物活性相關性*強、pH適用范圍寬泛等優勢，尤其適用于水溶性物質的檢測。

缺點：作為一種間接檢測方法，ABTS法需要制備自由基的發生體系。

適用樣本：廣泛應用于親水性和親脂性物質、純物質以及蔬菜、水果、飲料等樣品的總抗氧化能力評價。

DPPH法

該方法基于穩定的粉紅色DPPH構建了一套評價體系。DPPH作為一種穩定的自由基，易溶于甲醇、乙醇等極性溶劑。當抗氧化物質加入反應體系時，DPPH會被還原，其顏色逐漸從粉紅色變為黃色。由于DPPH在515nm處具有最大吸收峰，因此可以通過吸光度的變化，并以Trolox作為對照，來量化抗氧化物質的抗氧化能力。

優點：此方法簡單快捷，相較于ABTS法，無需制備自由基發生體系，特別適用于醇溶性物質的檢測。

缺點：DPPH自由基的選擇性較強，不與僅含一個羥基的芳香酸或無羥基的類黃酮反應，這類物質需采用其他方法進行測定。此外，若反應體系中存在在515nm處有吸收的物質（如胡蘿卜素），結果將受到干擾。由于血漿中的蛋白質在醇溶液中會沉淀，該方法也不適用于檢測血漿的抗氧化能力。

適用樣本：該方法廣泛應用于食品、植物提取液、果汁等物質的總抗氧化能力檢測。