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技術(shù)文章

絲氨酸(Ser)檢測(cè)|高效液相色譜法

閱讀:37          發(fā)布時(shí)間:2025-6-9

絲氨酸(Serine,縮寫(xiě)為 Ser)是一種非必需氨基酸,因其最早從蠶絲中提取分離而得名。在生命活動(dòng)的眾多過(guò)程中,絲氨酸扮演著至關(guān)重要的角色,參與眾多關(guān)鍵生理活動(dòng),對(duì)維持生物體的正常功能具有深遠(yuǎn)意義。

絲氨酸的分子式為 C?H?NO?,分子量為 105.09 g/mol。其化學(xué)結(jié)構(gòu)包含一個(gè)羧基(-COOH)、一個(gè)氨基(-NH?)和一個(gè)羥基(-OH)側(cè)鏈。這一羥基側(cè)鏈賦予了絲氨酸特殊的化學(xué)性質(zhì)和功能特性,使其既具有一定的親水性,又能參與多種化學(xué)反應(yīng)。在蛋白質(zhì)中,絲氨酸的羥基可以被磷酸化,這種翻譯后修飾在細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和調(diào)控中起著關(guān)鍵作用。通過(guò)磷酸化和去磷酸化過(guò)程,能夠開(kāi)啟或關(guān)閉蛋白質(zhì)的功能,進(jìn)而調(diào)控細(xì)胞的各種生命活動(dòng)。



代謝途徑

絲氨酸的代謝途徑復(fù)雜且至關(guān)重要。在合成方面,它可以由糖酵解的中間產(chǎn)物 3-磷酸甘油酸轉(zhuǎn)化而來(lái)。首先,3-磷酸甘油酸在 3-磷酸甘油酸脫氫酶的催化下,氧化為 3-磷酸羥基丙酮酸,隨后經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)氨基作用生成 3-磷酸絲氨酸,最后在磷酸絲氨酸磷酸酶的作用下,脫去磷酸基團(tuán),生成絲氨酸。在分解代謝中,絲氨酸在絲氨酸羥甲基轉(zhuǎn)移酶的作用下,與四氫葉酸反應(yīng),生成甘氨酸和 5,10-亞甲基四氫葉酸。5,10-亞甲基四氫葉酸是一碳單位代謝的重要載體,參與 DNA、RNA 和某些輔酶的合成,在細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和修復(fù)過(guò)程中發(fā)揮重要作用。此外,絲氨酸還能通過(guò)其他代謝途徑生成丙酮酸,進(jìn)入糖酵解或三羧酸循環(huán),為細(xì)胞提供能量。

高效液相色譜法基于不同物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間分配系數(shù)的差異,實(shí)現(xiàn)對(duì)混合物中各組分的分離與檢測(cè)。在絲氨酸檢測(cè)中,將樣品注入色譜柱,絲氨酸與其他物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相的作用下,因分子與固定相相互作用的強(qiáng)弱不同,在柱內(nèi)的保留時(shí)間存在差異,從而實(shí)現(xiàn)分離。分離后的絲氨酸隨流動(dòng)相依次流出色譜柱,進(jìn)入檢測(cè)器。通常采用紫外檢測(cè)器或熒光檢測(cè)器,利用絲氨酸的紫外吸收特性或通過(guò)衍生化反應(yīng)使其具有熒光特性,根據(jù)檢測(cè)到的信號(hào)強(qiáng)度與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)比,計(jì)算出樣品中絲氨酸的含量。


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