簡介

細胞遷移（細胞從一個位置移動到另一個位置）是正常或異常細胞生命過程中的一個關鍵部分。細胞遷移在各種生物過程中的重要性促使了開發用于研究機制的系統，這些機制旨在確定能夠促進（傷口愈合）或抑制（腫瘤形成）細胞遷移的治療成分。

本研究著重探討了使用 SpectraMax® MiniMax 300細胞成像計數儀的可行性，這是 SpectraMax® i3 多功能微孔板讀板機的可選升級，可使用 Platypus Technologies公司 的 Oris Pro細胞遷移實驗來可視化和分析細胞遷移。該檢測利用無毒生物相容性凝膠，該凝膠溶解并在每個孔的中心形成無細胞檢測區，從而可以研究細胞進入檢測區時所涉及的細胞遷移機制。

材料和方法

細胞培養和檢測

將 HT1080 細胞接種到隨 Oris Pro 細胞遷移檢測提供的 96 孔（20，000 個細胞/孔）或 384 孔（8，000 個細胞/孔）Corning 黑色透明底板中。這里使用了 I 型膠原蛋白包被版本（Platypus Technologies 產品目錄 #PROCMACC1）。該檢測使用無毒生物相容性凝膠在細胞培養表面上形成無細胞區。

接種后，將細胞置于加濕室（37°C；5% CO2）中約四小時，以允許細胞粘附。隨后，將含有測試化合物 cytochalasin D（一種已知會破壞細胞遷移的細胞滲透性霉菌毒素）或含有 0.1% DMSO 空白對照的新鮮培養基加入。

48 小時后，將孔板從培養箱中取出。MiniMax 細胞成像儀用于采集每個孔的透射光圖像，以便以后使用 Molecular Devices StainFree 細胞檢測技術進行分析。

細胞按照制造商說明書用 CellTracker綠色 CMFDA 染料（Thermo cat. # C2925）染色，使用 MiniMax 細胞成像儀的綠色熒光通道采集熒光圖像。采集圖像后，進行熒光終點讀取（激發 472 nm，發射 526 nm）以確定SpectraMax® i3 讀板機可用于檢測細胞遷移。

優勢

準確測量每孔單個圖像的細胞遷移

通過寬信號窗口獲得 StainFree 或熒光圖像分析的靈活性

使用 SoftMax Pro 軟件自動分析包含遷移細胞的感興趣區域