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蒂科(上海)生物科技有限公司

WM1799細(xì)胞,供應(yīng) WM1799細(xì)胞,蒂科生物

時(shí)間:2017-1-17閱讀:1628

細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)面面觀

具體步驟:

1.將水浴鍋預(yù)熱至40℃

2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。

3.在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過(guò)毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等等。

4.根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號(hào)。

5.從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對(duì)管外的編號(hào)。

6.迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化。

7.約1-2min后凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,

8.平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min

9.吸棄上清液。

10.向凍存管內(nèi)加入1ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。

zui后將細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)12-24小時(shí)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
 

注意事項(xiàng):

1>復(fù)蘇時(shí)選用的培養(yǎng)基要符合凍存管上標(biāo)明的培養(yǎng)基。2>操作人員應(yīng)戴防護(hù)面罩及手套,防止冷凍管可能爆裂之傷害。3>自液氮或干冰容器中取出冷凍管,檢查蓋子是否旋緊,由于熱脹冷縮過(guò)程,此時(shí)蓋子易松掉。

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