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如何保證良好的半制備/制備型液相色譜柱性能

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    液相色譜是20世紀(jì)60年代后期發(fā)展起來的分離分析技術(shù),是現(xiàn)代分離測定的重要手段。問世以來,因其具有分離效能高、分析速度快、檢測靈敏度好、能分析高沸點(diǎn)但不能氣化的熱不穩(wěn)定生理活性物質(zhì)的特點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、藥物及臨床分析。 半制備/制備型液相色譜柱由高壓液體泵、檢測器及液相色譜柱等三部分組成,其中液相色譜柱的正確安裝和使用,是液相色譜工作的關(guān)鍵;也是液相色譜工作者獲得正確可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的必經(jīng)之路。它還是消耗品,會隨使用時(shí)間或進(jìn)樣的次數(shù)增加,出現(xiàn)色譜峰高降低,峰寬加大或出現(xiàn)肩峰,柱效下降,所以需要定期進(jìn)行維護(hù)和保養(yǎng)。
    在使用液半制備/制備型液相色譜柱的過程中,如何保證良好的色譜柱壽命,如何保證良好的半制備/制備型液相色譜柱性能呢?只要注意好以下幾點(diǎn)即可
    1,認(rèn)真閱讀色譜柱的使用說明書,*按說明書的描述使用與保養(yǎng)色譜柱。選購柱子時(shí)一定要使用填料填充良好的色譜柱。
    2,盡量減少壓力的波動,避免機(jī)械及熱沖擊。在色譜柱分析樣品的過程中盡量使用保護(hù)柱和在線過濾器
    3,經(jīng)常以強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,充分過濾樣品和流動相,盡量避免雜質(zhì)微粒和強(qiáng)溶劑殘留.
    4,盡量使用穩(wěn)定的固定相,在PH值為6-8的中等PH值操作時(shí),使用有機(jī)緩沖溶液,色譜柱的使用溫度小于40度,若為硅膠基質(zhì)的液相色譜柱,應(yīng)保持流動相的PH范圍在2-8之間zui穩(wěn)妥.
    5,流動相中含有緩沖溶液時(shí),應(yīng)注意用95:5的水及有機(jī)溶劑過渡,有機(jī)溶劑不能低于5%。不能用純水去沖洗疏水的硅膠基質(zhì)的色譜柱.流動相一定要為純水的話請選購經(jīng)過極性封尾或者極性鑲嵌的反相色譜柱.
    6,不用色譜柱需儲存時(shí),沖洗掉鹽和緩沖液,用純有機(jī)流動相保存,為乙腈.

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