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二維液相色譜丨含碘造影劑,你的微量手性雜質我來查

閱讀:736        發(fā)布時間:2022-4-22


導讀

最近看到一則新聞,某患者因為肺部感染、哮喘,到醫(yī)院放射科做了CT平掃,發(fā)現(xiàn)有一肺部腫塊,醫(yī)生建議再做個增強CT來進一步確定疾病的性質。那么,新聞中所說的增強CT究竟是什么呢?其實,增強CT就是指在CT平掃基礎上,對發(fā)現(xiàn)的可疑部位,在經靜脈注入含碘造影劑后,進行有重點的檢查。也許您有疑問,為什么要注入含碘造影劑呢?它的安全性又如何控制呢?

 

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為什么要注入含碘造影劑呢?

含碘造影劑具有密度大的特點,經靜脈注射進入體內后,因為病變組織內或血管豐富或血流緩慢而在病理組織中停滯、積蓄,使病變組織與鄰近正常組織間的密度對比增加(即影像上黑白對比增加),CT圖像能夠更加清楚地顯示組織血流和病變情況,以幫助鑒別疾病的良、惡性,提高病灶的定性能力,從而提高診斷準確率。

 

含碘造影劑小科普

含碘造影劑的變遷

20世紀50年代被發(fā)現(xiàn)后,含碘造影劑經歷了第一代的離子型造影劑飛躍到非離子型單體造影劑,再次飛躍到非離子型二聚體造影劑的過程。

 

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1  4種碘化CT造影劑的化學結構:離子單體、離子二聚體、非離子單體和非離子二聚體

 

目前被廣泛用于臨床的非離子型造影劑,如碘帕醇、碘海醇、碘普羅胺、碘曲輪、碘克沙醇等,具有毒性低、性能穩(wěn)定、低滲等滲、耐受性好等優(yōu)點。

 

碘帕醇的手性構型

碘帕醇是一種非離子型水溶性碘造影劑,具有良好的顯影作用,對血管壁及神經組織毒性低,化學性質穩(wěn)定,不良反應較少,適應范圍廣。

 

碘帕醇(CAS號:66166-93-0)有1個手性中心,兩個異構體(S-構型、R-構型),結構式見圖2。碘帕醇中的R-碘帕醇含量增加會使碘帕醇注射液黏度升高,進而導致碘帕醇注射液的不良反應增加。因此控制不良構型的含量是碘帕醇及其他含碘造影劑質量控制的關鍵步驟。  

 

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2  碘帕醇的S構型(左)和R構型(右)

 

 

碘帕醇的一維手性分離探索

利用色譜柱中手性固定相對異構體的吸附速度不同實現(xiàn)的色譜分離是常用手段。以Chiralpak MA(+)色譜柱和硫酸銅溶液為流動相建立碘帕醇的分離,R/S-碘帕醇分離結果如圖3所示。

 

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3  250 mg/L濃度的R-碘帕醇樣品溶液 (1)和S-碘帕醇樣品溶液(2) 的1stD LC色譜圖

 

通過分離結果可以看到,該手性分離體系能在20 min內實現(xiàn)碘帕醇兩種構型的手性分離,但和多數(shù)液相手性分離的色譜行為相似,存在柱效較低的問題,因此在定量分析中對于含量較低的待測物的檢出存在不足。

 

島津解決方案

對于類似碘帕醇這樣的分子結構提示其可在反相色譜上有良好保留,因此考慮構建手性色譜體系和反相色譜體系的二維液相色譜系統(tǒng),對已獲分離的異構體雜質再次進行反相色譜分離以提高檢測的靈敏度。

 

手性構型的二維分離

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分離結果解析

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R-碘帕醇溶液(0.5 mg/L)2D LC 分析色譜圖

 

5-10min間為R碘帕醇在1維液相上的保留,可以看到該濃度下無明顯色譜峰,無法進行定量分析。經過閥切換將R碘帕醇在1維液相上的組分切入二維后,通過反相色譜作用,可以在16.5min左右發(fā)現(xiàn)明顯的色譜峰同手性分離的 1 stD LC 結果相比,經過二維液相色譜分離的 R-碘帕醇靈敏度較之有 10 倍的提升。

 

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結語

藥物雜質的高靈敏檢查是控制藥物純度,提高藥品質量的一個非常重要的環(huán)節(jié)。為了讓含碘造影劑更加安全的為患者服務,島津的二維液相色譜系統(tǒng)可發(fā)揮作用,彌補手性色譜柱效不足的缺點,既獲得兩種異構體的有效分離,又在經過反相色譜分離中獲得良好響應。

 

 


 

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