峰展寬?峰分叉?可能與溶劑效應(yīng)有關(guān)!應(yīng)對思路供您參考!
《中國藥典》2020年版實施已達10個月,中藥配方顆粒*160個國家標準發(fā)布已有半年以上,島津技術(shù)人員在走訪客戶時發(fā)現(xiàn),多位客戶反饋在多個項目(2341通則禁用農(nóng)藥殘留量檢測、2351通則液質(zhì)聯(lián)用法擴項、配方顆粒特征圖譜重現(xiàn))上進行方法重現(xiàn)時遇到“峰展寬”或者“峰分叉”現(xiàn)象。
“峰展寬”或者“峰分叉”一般與“溶劑效應(yīng)”有較大關(guān)聯(lián),原因在于樣品(對照品和供試品溶液在制備時)溶劑的洗脫強度強于流動相強度,強洗脫溶劑不均衡地參與了目標物的洗脫,使色譜峰保留時間整體提前,而樣品在柱前的不充分擴散導致了峰形扭曲。
這種影響輕則導致峰展寬,嚴重時甚至導致峰分叉,給定性定量帶來影響,結(jié)合島津技術(shù)人員所做案例,以下應(yīng)對思路供廣大客戶參考。
應(yīng)對思路及案例
使用流動相、初始比例流動相或洗脫強度盡量低的液體作為樣品溶劑,應(yīng)注意使用該溶劑應(yīng)不影響待測物的溶解性。
烏梅配方顆粒對照品參照物溶液不同溶解溶劑對比圖
使用較弱洗脫強度的溶劑稀釋樣品,應(yīng)注意使用該溶劑應(yīng)不影響待測物的溶解性。
如《中國藥典》2020年版四部“2341第五法藥材及飲片(植物類)中禁用農(nóng)藥多殘留測定法”LC-MS/MS法上樣前加水是很好的方式。
降低進樣體積,但需要注意此方法可能會降低靈敏度,對于痕量分析可能影響定量。
赤芍配方顆粒特征圖譜項目中對照品參照物溶液測試:沒食子酸對照品、原兒茶醛對照品、兒茶素對照品、芍藥苷對照品。
增加柱前管路體積,一般使用更粗的管路比更長的管路有效。
使用co-injection功能
co-injection功能原理
co-injection使用方法
使用技巧:為獲取更好效果,純化水吸取量一般為進樣體積3-5倍。
co-injection在藥典和配方顆粒項目分析檢驗中的應(yīng)用
1、禁用農(nóng)藥殘留量檢測:LC-MS/MS方法,進樣體積為2μL,純化水吸取量10μL。
2、真菌毒素檢測:2351通則第六法嘔吐毒素項,進樣體積為5μL,純化水吸取量20μL。
3、配方顆粒應(yīng)用:赤芍配方顆粒特征圖譜項目(對照品參照物溶液),進樣體積為10μL,純化水吸取量30μL。
以上三個項目案例可以看到,通過在線稀釋進樣,峰形改善,同時靈敏度有提升!
應(yīng)對思路總結(jié)