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Hieff TransTM脂質體轉染試劑,讓您對轉染自信滿滿

2017-5-5  閱讀(2538)

分享:

——效率高不高,一轉便知道

 

關鍵詞:liposomal ; transfection ; lipo2000 ; lipo3000

 

轉染效率低,細胞毒性大,操作步驟太繁瑣?怎么辦?

 

你需要有一種超能力的轉染試劑來成就你的轉染實驗

 

    轉染能夠讓我們更好的研究目的基因是如何在細胞中進行表達和調控。目前常見的轉染方法有:磷酸鈣共

 

沉淀法、電穿孔法、DEAE-葡聚糖和ploybrene、機械法(如顯微注射和基因槍法)、陽離子脂質體試劑,其中

 

陽離子脂質體試劑轉染是目前zui常用的轉染方法。

 

       Hieff TransTM脂質體核酸轉染試劑作為一款陽離子脂質體轉染試劑,與應用的Lipo2000相比,

 

具有更高的轉化效率和更加便捷的操作。目前已經在多種細胞系中得以驗證,如常見的細胞系293THela

 

MCF-7以及相對應用比較少的Raw264.7COS-7Hep3B等細胞。其中常見細胞系的轉染效率達90%以上,

 

遠遠可以滿足我們對于轉染實驗的需求。

 

作用原理:

 

    陽離子能夠通過表面所帶正電荷的靜電作用將核酸包裹,形成核酸-脂質體復合體。細胞膜表面帶負電

 

荷,能夠將該復合體吸附,被吸附后的復合體能夠通過膜的融合作用或者細胞內吞的方式形成包涵體進入細

 

胞。有小部分的DNA 能夠從包涵體中被釋放,并進入細胞質中,再進一步進入細胞核內轉錄、表達。

 

 

 

1:脂質體介導的轉染和內吞過程

 

產品特點:

 

性: 可對大多數真核細胞進行轉染,并且對于常見細胞系轉染效率達90%以上。

 

低毒性:轉染細胞形態良好并產生大量的轉染基因蛋白

 

操作簡便:可以直接將脂質體復合物加入到含血清的培養基中。

 

多樣性:適合瞬時轉染和穩定轉染。

 

 

 

操作流程:

 

 

 

 

 

2:細胞轉染實驗流程

 

產品數據:

 

客戶提供部分細胞系轉染數據(僅供參考)

 

 

細胞

 

培養板

 

細胞密度

 

DNA

 

Hieff Trans

 

效率

 

293T

 

6

 

80%

 

1μg

 

2μl

 

90%

 

293FT

 

24

 

85%

 

1μg

 

4μl

 

90%

 

Hela

 

12

 

90%

 

0.2μg

 

0.6μl

 

90%

 

Raw264.7

 

35mm

 

80%

 

1μg

 

2μl

 

90%

 

Hek293

 

6

 

95%

 

2μg

 

10μl

 

80-90%

 

NCI-H1975

 

6

 

80%

 

4μg

 

10μl

 

80%

 

3t3

 

12

 

90%

 

1μg

 

5μl

 

50%

 

 

驗證過的細胞系

 

 

293T

 

293FT

 

HEK293

 

HEK 293T

 

Caco2

 

COS-7

 

DF-1

 

Lenti X-293T

 

HeLa

 

HepG2

 

LM3

 

MCF-7

 

MDA-MB-231

 

MEF

 

NCI-H1975

 

NIH-3T3

 

PC12

 

Raw264.7

 

Vero

 

H9c2

 

Hepa1-6

 

MCF10A

 

CHO

 

5-8F

 

BV-2

 

A549

 

3t3

 

H520

 

HUVEC

 

C6

 

HaCaT

 

N2A

 

SGC-7901

 

H9

 

MKN-28

 

Hep 3B

 

SMCC7721

 

RKO

 

C2C12

 

More…

 

客戶反饋結果展示

 

 

 

 

Hieff TransTM Liposomal 轉染應用

           

           

 

細菌蛋白激活細胞自噬體形成

 

細胞:Hela   轉染質粒:細菌效應蛋白A   LC3II:自噬體標記蛋白

 

細胞分裂紡錘體結構

 

細胞Hela   轉染質粒:Flag-tubulin   細胞核染色:Hoechst33342

 

 

 

DNA轉染

 

 

DNA轉染

     

 

          

         

 

Hieff Trans

 

Lipo3000

 

 

Hieff Trans

 

Lipo2000

 

圖片來源:復旦大學 細胞系:Hek293 核酸類型:DNA

 

 

圖片來源:長春應化所 細胞系:Hela 核酸類型:DNA

 

 

價格比較:

  

       

 

單次反應各公司價格對比

 

常見問題:

 

Q1:配制核酸轉染試劑復合物時能否有血清的存在?

 

答:血清的存在會影響脂質體的形成,建議配制核酸轉染試劑復合物時采用無血清培養基(一般推薦MEM培養

基)。

 

Q2:轉染實驗過程中是否需要更換成無血清培養基?

 

答:不需要,我們的轉染試劑可以在含血清的介質中進行轉染的過程。

 

Q3:轉染后需要進行終止嗎?

 

答:不需要脂質體復合物可以穩定存在6個小時。如果在進行轉染前沒有進行細胞換液,為了保證細胞正常

生長所需的營養,需要在46小時后換用新的培養基。但如果轉染之前已進行過換液則在脂質體轉染后不需要

進行再次換液

 

Q4:轉染試劑的保存及使用過程中的注意事項?

 

答:本試劑一定要4℃保存,要注意避免反復多次長時間開蓋,長時間開蓋會導致脂質體氧化而影響轉染效

率。

 

Q5:若想提高轉染效率,應該注意什么?

 

答:a:轉染時細胞的密度,90%-95%

 

b:轉染時,核酸和脂質體稀釋液要用MEM無血清培養基。

 

c:轉染后4-6h可選擇換液。

 

參考文獻:

 

Su D N, Wu S P, Chen H T, et al. HOTAIR, a long non-coding RNA driver of malignancy whose

expression is activated by FOXC1, negatively regulates miRNA-1 in hepatocellular carcinoma[J].

Oncology Letters, 2016, 12(5):4061.

 

我們的回報——有買有

 

產品信息:

 

 

貨號

 

名稱

 

規格

價格(元)

*(元)

 

40802ES03

 

Hieff TransTM 脂質體核酸轉染試劑

 

1.0mL

 

1308.00

 

868.00

 

購買/

 

贈送/

 

5

 

3

 

15

 

15

 

30

 

40

 

50

 

70

 

活動條款:

 

1.活動時間:2017.4.10-2017.6.30

 

2.本活動可與“整裝待發 翊起GO”活動疊加參與;

 

3.本活動zui終解釋權歸上海翊圣生物所有。

 

產品訂購:

 

 

產品名稱

 

產品編號

 

規格

 

價格(元)

 

Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質體核酸轉染試劑

 

40802ES02

 

0.5 mL

 

738.00

 

Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質體核酸轉染試劑

 

40802ES03

 

1.0 mL

 

1308.00

 

Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質體核酸轉染試劑

 

40802ES08

 

5×1 mL

 

4878.00

 

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產品編號

 

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40805ES02

 

0.5 mL

 

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Hieff TransTM懸浮細胞脂質體核酸轉染試劑

 

40805ES03

 

1.0 mL

 

1678.00

 

Hieff TransTM懸浮細胞脂質體核酸轉染試劑

 

40805ES08

 

5×1 mL

 

5268.00

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