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高活性Wnt3a,經多種類器官培養驗證

2023-10-11  閱讀(178)

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高活性Wnt3a,經多種類器官培養驗證

 

 

類器官是在體外建立的與體內組織或器官高度相似的一種三維模型,在疾病建模、器官再生和個性化治療領域發揮重要作用。類器官的培養需要多種細胞因子的維持,其中Wnt3a是的因子之一,在大多數組織來源的類器官培養中起關鍵作用。

 

 

PART1
什么是Wnt-3a?
 
Wnt家族是一個巨大的分泌蛋白家族,該家族包含19種人類蛋白質,包括Wnt1、Wnt2、Wnt2b(Wnt13)、Wnt3、Wnt3a、Wnt4、Wnt5a、Wnt5b、Wnt6、Wnt7a、Wnt7b、Wnt8a、Wnt8b、Wnt9a(Wnt14)、Wnt9b(Wnt14b)、Wnt10a、Wnt10b、Wnt11 和 Wnt16。該家族高度保守,富含半胱氨酸。Wnts 通過與細胞膜受體結合和/或通過與相鄰細胞膜受體結合介導Wnt信號通路。Wnt信號通路可分為經典通路和非經典通路。一種參與β-catenin介導的經典信號通路,包括Wnt1,Wnt2,Wnt2b、Wnt3、Wnt3a、Wnt7a、Wnt8、Wnt8b和Wnt10a;另一種即不依賴β-catenin的非經典信號通路,包括Wnt4,Wnt5a,Wnt6和Wnt11。Wnt3a作為Wnt家族有代表性的信號蛋白,其分布廣泛,在調節多效性細胞功能(包括自我更新、增殖、分化和運動)中起關鍵作用。

 

PART2
Wnt-3a信號通路傳導機制
 
Wnt信號通路是一個復雜的蛋白質作用網絡,其功能最常見于胚胎發育和癌癥,但也參與成年動物的正常生理過程。Wnt3a與其受體卷曲 (Fz) 蛋白和脂蛋白受體相關蛋白 (LRP5/6) 共受體結合,然后激活支架蛋白 Disheveled (Dvl) ,并引起“破壞復合物"的解離(破壞復合物由酪蛋白激酶 1 (CK1)、糖原合酶激酶-3β (GSK-3β) 和支架蛋白腺瘤性結腸息肉 (APC)、Axin1 和 Axin2 形成的)。 “破壞復合物"的解離穩定細胞質中游離狀態的β-Catenin蛋白,細胞質中積累的β-Catenin蛋白進入細胞核與TCF/LEF家族的轉錄因子結合,從而啟動下游靶基因(如c-myc、Cyclin D1等)的轉錄,誘導后續的細胞反應的發生。我們可以把Wnt信號通路簡單概括為:Wnt3a→FZD→DVL→復合體解散→β-Catenin入核→TCF/LEF→下游基因轉錄。沒有Wnt3a,β-連環蛋白不會在細胞質中積累,因為“破壞復合物"通常會降解它,通過將β-連環蛋白靶向泛素化而降解β-連環蛋白,隨后將其送至蛋白酶體進行消化,無法入核啟動下游基因轉錄。Wnt/β-catenin信號通路是生物體進化中最保守的通路之一,在胚胎發育、細胞生長、分化、極性形成、神經發育和癌變中起關鍵作用。

 

圖1. Wnt3a的經典信號通路(源自參考文獻)

 

PART3
Wnt3a 與類器官
 

Wnt3a是類器官構建的培養因子之一,其高活性、批次間穩定、無污染和無血清制備是類器官實驗成功的關鍵。Wnt3a目前已用于腸、胃類、胰腺、肝臟、甲狀腺、食道及神經系統等類器官培養。為助力科研和藥企人員針對Wnt3a在類器官形成,以及在腫瘤中的臨床應用研究,YEASEN推出Wnt3a高活性蛋白(Cat: 92276ES)產品,助力類器官培養。

 

PART4
產品數據展示
 
 
高純度

SDS-PAGE

Figure 2. Human wnt3a Protein on SDS PAGE under reduced condition. The purity is greater 

 

 
高活性

Cell Based Assay

Figure 3. Measured by its ability to induce Topflash reporter activity in HEK293T human embryonic kidney cells. The ED50 for this effect is 25 ng/mL.

 

 
腸道類器官驗證

Organoid Culture

Figure 4. Human intestinal organoids were cultured with Wnt3a . The organoids showed good morphology.

 

PART5
多種類器官培養驗證
 

 

PART6
相關產品信息
 

 

 

PART7
參考文獻
 
1.Zheng W J, Yao M,2, Fang M, et al . Oncogenic Wnt3a: A Candidate Specific Marker and Novel Molecular Target for Hepatocellular Carcinoma[J].Journal of cancer,2019.

 


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