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胃癌(gastric cancer,GC)是惡性腫中常見腫瘤之一,在消化道的惡性腫瘤中約占 50%。胃癌的發病機制與胃黏膜損傷、亞硝基化合物攻擊及幽門螺桿菌感染等因素密切相關,是一個聯合了多因素、多階段的發生、發展過程。所以建立胃癌模型,對于研究和防治胃癌是至關重要的。
N-甲基-N'-硝基-N-亞(MNNG)是一種N-亞硝基化合物,屬于可直接與 DNA作用的遺傳毒物,通過直接靶定 DNA 而誘發細胞產生遺傳毒性應激,并導致染色體異常、姐妹染色單體改變、點突變以及細胞死亡,是化學致癌物誘變機理研究中常用的一種模式化合物。
圖1 MNNG分子結構
MNNG誘導胃癌建模步驟(僅供參考)
動物:
選取動物時,一般要求其飼養方便,癌誘發率高,目前范圍內主要選用大鼠、小鼠、裸鼠等小動物建立模型,選取大動物的一般較少,根據實驗結果的各種需要,也有人選取犬、雪貂、旱獺等建立胃癌動物模型。因為大鼠、小鼠等成本低廉,容易飼養,取材方便,而且誘癌周期相對較短,所以在實驗研究中常常大批量運用,其中 Wistar 大鼠因為誘癌率較高,常常為動物之一。
MNNG配置:
取6 g的MNNG粉末,加入DMSO溶液約30 mL,使其充分溶解配制成20%(w/v)的溶液,再用超純水定容至濃度為10 mg/mL的母液,置于4℃冰箱避光保存,臨用前再取適量母液用超純水稀釋至濃度為100µg/mL。
造模方法:
1、喂養第1周起給予濃度為100 μg/mL MNNG的溶液作為常規飲用水。
2、飼養8周后,用上述飲用水配制粉狀飼料替代原來使用的塊狀飼料喂飼大鼠。
3、24周后仍改用塊狀飼料喂養,但MNNG水劑改為隔天給予。
4、28周停止給予MNNG飲用水,改用自來水喂養。
檢查指標:
1、組織病理檢測
2、檢測IL-6、IL-1β、TNF-α、VEGF和TGF-β胃癌相關炎癥因子
模型優點:
自由飲用操作難度低,性價比高
實驗案例
圖2 大鼠胃組織的組織病理學檢查(放大×200)
實驗采用雄性Wistar大鼠,7-8周,口服灌胃MNNG(200 mg/kg BW),周期60天,檢測(A) H&E染色切片、(B)caspase 9、(C)Bax和(D)Bcl-2蛋白的IHC染色切片。
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胃癌動物建模試劑 | N-甲基-N'-硝基-N-亞(MNNG) | 60397ES03/08 | 1/5 g |
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